慢病毒介导的RNA干扰对乙型脑炎病毒感染的抑制作用

摘要

目的:研究由慢病毒介导的RNA干扰对乙型脑炎病毒(JEV)感染细胞与小鼠的抑制作用。方法:以JEV的C、NS3、NS4A和NS5基因为靶点，设计特异性siRNA序列，并构建重组传导慢病毒。对慢病毒预处理的BHK21细胞接种JEV,并通过相对定量PCR、病毒蚀斑和间接免疫荧光实验检测慢病毒对JEV的抑制作用。对慢病毒预处理的7日龄乳鼠脑内接种JEV,5 d后测定其脑组织中的病毒滴度；选取3周龄小鼠做攻毒保护实验。结果:在细胞中，4种重组慢病毒均使JEV的RNA载量与病毒滴度降低(P<0.05),其中LV-C组的RNA载量降低了89.7%,病毒滴度下降约1 200倍。4组乳鼠的脑组织中，JEV病毒滴度均降低(P<0.05),其中LV-C组病毒滴度下降约1 700倍；4种重组慢病毒对3周龄小鼠的攻毒保护率为50%～70%。结论:由慢病毒介导的靶向JEV的C、NS3、NS4A与NS5基因的RNAi对JEV感染细胞与小鼠具有抑制作用，且有一定持续性，其中靶向C基因的RNAi的抗病毒效果最强。

关键词

乙型脑炎病毒 / 慢病毒 / RNA干扰 / 抗病毒

基金资助

四川省南充市市校合作科研项目(18SXHZ0497);; 川北医学院校级科研发展计划项目(CBY18-A-YB03)