槐耳多糖抑制AEG-1表达对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的:探究槐耳多糖(HP)对子宫内膜癌细胞生物学行为和星形胶质细胞升高基因1(AEG-1)表达的影响。方法:采用不同浓度HP(0～11μg/mL)处理人子宫内膜癌ishikawa细胞24 h,通过检测细胞活力确定HP处理浓度；将ishikawa细胞分为Ct组(正常培养)、HP-L组(1μg/mL HP)、HP-H组(5μg/mL HP)、si-NC组(转染si-NC)、si-AEG-1组(转染si-AEG-1)、HP-H+pcDNA组(转染pcDNA+5μg/mL HP)、HP-H+pcDNA-AEG-1组(转染pcDNA-AEG-1+5μg/mL HP)。CCK-8法、EdU染色测定细胞增殖活性；流式细胞术、Transwell、划痕实验分别检测细胞凋亡、侵袭、迁移；Western blot评估AEG-1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平。通过细胞实验分组进行裸鼠体内成瘤试验检测HP及AEG-1对裸鼠肿瘤生长的影响。结果:选取1μg/mL HP、5μg/mL HP分别作为后续处理ishikawa细胞的低、高剂量浓度；与Ct组比较，HP-L组、HP-H组细胞OD450值、EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、AEG-1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平、裸鼠肿瘤质量均降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平均升高(P<0.05);与Ct组、si-NC组比较，si-AEG-1组细胞OD450值、EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、AEG-1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平、裸鼠肿瘤质量均降低，细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平均升高(P<0.05);与HP-H组、HP-H+pcDNA组比较，HP-H+pcDNA-AEG-1组细胞OD450值、EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、AEG-1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平、裸鼠肿瘤质量均升高，细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论:槐耳多糖可能通过下调AEG-1调控ishikawa细胞生物学行为。

关键词

槐耳多糖 / 星形胶质细胞升高基因1 / 细胞增殖 / 细胞迁移