载脂蛋白D激活Wnt/β-catenin信号通路参与牙髓细胞增殖分化过程

摘要

目的 探究载脂蛋白D(apoliprotein D,APOD)激活果蝇无翅基因蛋白/β-连锁蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路参与牙髓细胞(dental pulp cells, DPCs)增殖分化过程。方法 体外培养人牙髓细胞(human dental pulp cells, HDPCs),设置空白组、APOD低剂量组、APOD高剂量组和si-APOD组。空白组于DMEM培养基培养，APOD低剂量组向培养基中加入2 nmol/L APOD,APOD高剂量组向培养基中加入32nmol/LAPOD,si-APOD组采用APOD si-RNA转染HDPCs细胞。采用RT-qPCR检测APOD mRNA表达水平，CCK-8检测细胞增殖能力，碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性检测成骨分化能力，Western Blot检测Wnt/β-catenin通路蛋白表达量。结果 与空白组比较，APOD低剂量组、APOD高剂量组APOD mRNA水平及细胞活力升高，7、14 d的ALP活性升高，Wnt5a、β-catenin蛋白上调(P<0.05),si-APOD组APOD mRNA水平，细胞活力降低，7、14 d的ALP活性降低，Wnt5a、β-catenin蛋白下调(P<0.05);与APOD低剂量组比较，APOD高剂量组APOD mRNA水平及细胞活力升高，7、14 d的ALP活性升高，Wnt5a、β-catenin蛋白上调(P<0.05),si-APOD组APOD mRNA水平及细胞活力降低，7、14 d的ALP活性降低，Wnt5a、β-catenin蛋白下调(P<0.05);与APOD高剂量组比较，si-APOD组APOD mRNA水平及细胞活力降低，7、14 d的ALP活性降低，Wnt5a、β-catenin蛋白下调(P<0.05)。结论 APOD能够促进HDPCs细胞的增殖分化，其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词

牙髓 / 细胞增殖 / 载脂蛋白D类