circ＿0086414通过miR498-/PCK1轴对口腔鳞状细胞癌生物学行为的影响

摘要

目的 研究circ＿0086414通过miR-498/PCK1轴对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinomas, OSCC)生物学行为的影响。方法 收集手术切除的OSCC组织及配对的癌旁组织27对，实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测组织中circ＿0086414和PCK1的表达。将SJG-1细胞分为pcDNA组、pcDNA circ＿0086414组、miR-498 NC组、miR-498 mimic组、OE-NC组、OE-PCK1组、miR-498 NC+pcDNA组、miR-498 NC+pcDNA circ＿0086414组、miR-498 mimic+pcDNA组、miR-498 mimic+pcDNA circ＿0086414组，细胞计数试剂盒(cell counting kit, CCK8)法检测SJG-1细胞增殖，流式细胞术检测SJG-1细胞凋亡，Transwell实验检测SJG-1细胞侵袭；蛋白免疫印迹(Western blot, WB)实验检测上皮间质转化情况，双荧光素酶报告基因检测circ＿0086414和miR-498及miR-498和PCK1的关系。结果 与癌旁组织比较，OSCC组织中circ＿0086414相对表达明显降低(P<0.001);与人正常口腔角质细胞HOK比较，人OSCC细胞系HEK293T、SJG-1、SCC-15、HSC-2中circ＿0086414相对表达显著降低(P<0.001);与pcDNA组比较，pcDNAcirc＿0086414组SJG-1细胞增殖能力明显降低，凋亡率明显升高，侵袭能力明显减少，N-cadherin表达水平显著减少，E-cadherin表达水平明显升高(均P<0.001);与miR-498 NC组比较，miR-498mimic组SJG-1细胞增殖能力明显升高，凋亡率显著降低，侵袭能力明显增加，N-cadherin表达水平显著增加，E-cadherin表达水平明显减少(均P<0.001);与miR-498 NC+pcDNA组比较，miR-498 NC+pcDNAcirc＿0086414组SJG-1细胞增殖能力明显降低，凋亡率明显升高，侵袭能力明显降低，N-cadherin表达水平明显降低，E-cadherin表达水平明显升高，miR-498 mimic+pcDNA组SJG-1细胞增殖能力明显升高，凋亡率明显降低，细胞侵袭能力明显升高，N-cadherin表达水平明显升高，E-cadherin表达水平明显降低(均P<0.001),与miR-498 mimic+pcDNA组比较，miR-498 mimic+pcDNAcirc＿0086414组的SJG-1细胞增殖能力明显降低，凋亡率明显升高，侵袭能力明显降低，N-cadherin表达水平明显降低，E-cadherin的表达水平明显升高(均P<0.001);与OE-NC组比较，OE-PCK1组SJG-1细胞增殖能力明显降低，凋亡率明显升高，细胞侵袭能力明显减少，N-cadherin表达水平显著减少，E-cadherin表达水平明显升高，PCK1的相对表达量明显升高(均P<0.001)。结论 circ＿0086414在OSCC细胞和组织中的表达下调，过表达circ＿0086414抑制OSCC细胞的恶性行为。通过调控miR-498/PCK1轴刺激细胞凋亡，为探索OSCC诊断和治疗的生物标志物提供有意义的实验依据，为OSCC的治疗提供新的诊疗思路。

关键词

口腔肿瘤 / 癌,鳞状细胞 / RNA,环状