顺铂耐药性肺癌荷瘤裸鼠模型的建立与评价

摘要

目的 建立顺铂耐药性肺癌荷瘤裸鼠模型，并对造模效果进行评价。方法 体外培养人肺腺癌A549细胞与人肺腺癌顺铂耐药型A549细胞（A549/DDP）,接种细胞悬液于裸鼠背部皮下，构建肺癌荷瘤裸鼠模型。分离瘤体细胞，进行原代培养。选择顺铂溶液为实验用药，按照浓度梯度（0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32与64 mg/L）依次设立10个组别，分别对A549及A549/DDP细胞进行干预。采用四甲基偶氮唑盐法检测3个时间节点（24 h、48 h与72 h）下的OD值，计算细胞抑制率；获得顺铂的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC₅₀),确定耐药倍数，验证肺癌模型是否具备顺铂耐药性质。结果 （1）随着时间、浓度的增加，顺铂对A549/DDP细胞的抑制率逐渐升高，组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）随着时间、浓度的增加，顺铂对A549细胞的抑制率逐渐升高，组间、时点间差异均有统计学意义（P<0.05）;且组间与时点间存在交互作用（P<0.05）。（3）在相同时间、相同浓度下，顺铂对A549细胞的抑制率明显高于A549/DDP细胞；且组间差异有统计学意义（P<0.05）。（4）随着时间的增加，顺铂对A549、A549/DDP细胞的IC₅₀值均逐渐降低，组间、时点间差异有统计学意义（P<0.05）;且组间与时点间存在交互作用（P<0.05）。（5）干预24 h、48 h与72 h下，获得的耐药倍数分别为12.395±1.209、29.043±2.178、16.902±0.727;组间差异有统计学意义（P<0.05）。均提示细胞高度耐药，其中，48 h耐药性质最佳。结论 通过皮下接种A549/DDP细胞悬液，可成功构建顺铂耐药性质的肺癌荷瘤裸鼠模型。该模型可为进一步研究耐药发生与演变的生物学机制提供良好的载体。

关键词

肺肿瘤 / 顺铂 / 抗药性,肿瘤

基金资助

国家自然科学基金项目(81973783); 北京中医药大学新教师启动基金项目(2022-JYB-XJSJJ-087)