miR106a-5-p对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

摘要

目的 探讨miR-106a-5p/程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)轴对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)细胞恶性生物学行为的影响及分子机制。方法 通过实时荧光定量PCR检测NPC细胞系HNE1及永生化正常鼻咽上皮细胞NP69中miR-106a-5p和PD-L1 mRNA的表达水平；Western blot检测PD-L1蛋白表达；双荧光素酶报告实验验证miR-106a-5p与PD-L1之间的靶向调控关系；miR-106a-5p mimics及inhibitor、si-PD-L1及PD-L1转染HNE1细胞；细胞计数试剂盒8检测细胞增殖能力；划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果 NPC细胞中miR-106a-5p和PD-L1的表达水平显著高于正常鼻咽上皮细胞(miR-106a-5p:P=0.001,PD-L1-mRNA:P=0.012,PD-L1-蛋白：P=0.008)。双荧光素酶报告实验表明PD-L1是miR-106a-5p的直接靶点。miR-106a-5p mimics显著上调PD-L1的mRNA和蛋白水平(P=0.010;P=0.037),而miR-106a-5p inhibitor显著抑制PD-L1的表达(P<0.001)。PD-L1过表达导致miR-106a-5p水平显著升高(P<0.05),敲低PD-L1导致miR-106a-5p水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-106a-5p或PD-L1均可显著增强HNE1细胞增殖、侵袭和迁移能力(均P<0.05),同时敲低PD-L1或miR-106a-5p均可逆转这一效应(均P<0.05)。相反，敲低miR-106a-5p或PD-L1均显著抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力，同时过表达PD-L1或miR-106a-5p能够逆转该抑制作用(均P<0.05)。结论 miR-106a-5p与PD-L1间存在正反馈调控，促进NPC细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词

鼻咽癌 / 细胞增殖 / 迁移和侵袭