H9C2大鼠心肌细胞心衰模型中G9a与BDNF水平与心力衰竭的关系

摘要

目的 构建心力衰竭(heart failure, HF)细胞模型，研究H9C2大鼠心肌细胞中常染色质组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2(euchromatic histone-lysine N-methyltransferase 2,EHMT2或G9a)通过组蛋白H3第9位赖氨酸发生二甲基化(Histone H3K9 dimethylation, H3K9me2)调控脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表达，参与HF发生。方法 通过H9C2大鼠心肌细胞培养、传代、基因转染、氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation, OGD)处理，构建HF细胞模型，应用逆转录定量聚合酶链式反应、免疫印迹法等方法检测OGD处理的HF细胞模型中、对照组中G9a mRNA的表达；检测OGD处理的HF细胞模型中敲低G9a后BDNF mRNA的表达量；检测H9C2细胞中，经OGD处理的H9C2、敲低G9a后经OGD处理后的H3K9me2的表达量。结果 G9a在OGD处理的细胞模型中表达上调；敲低G9a基因后可抑制OGD处理后的H9C2大鼠心肌细胞的凋亡和损伤；敲低G9a通过抑制BDNF启动子的H3K9me2修饰促进BDNF的表达；敲低BDNF部分逆转sh-G9a通过激活酪氨酸激酶受体B信号通路来减轻心肌细胞凋亡和损伤。结论 H9C2大鼠心肌细胞HF模型中，G9a通过H3K9me2调控BDNF的表达，参与HF的发展，可以为临床HF标志物研究提供思路。

关键词

心力衰竭 / 脑源性神经营养因子 / 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2