红景天苷抑制腺泡细胞焦亡减轻大鼠急性胰腺炎的机制研究

摘要

目的 探讨红景天苷对急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)大鼠的治疗作用及其潜在机制。方法 将30只Wistar大鼠随机分为对照组、AP组和AP+红景天苷组，每组10只。AP组与AP+红景天苷组通过胆胰管逆行注射2%牛磺胆酸钠建立AP模型。AP+红景天苷组在造模后立即腹腔注射红景天苷溶液(4.0 mg/kg),2次/d,对照组及AP组注射等体积生理盐水。造模24 h后，采集血液，处死大鼠，收集胰腺组织。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清中淀粉酶(amylase, AMY)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)水平；苏木素-伊红(hematoxlin-eosin, HE)染色观察胰腺组织病理学改变；免疫荧光与Western blot检测焦亡相关蛋白、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)和核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)表达水平。采用牛磺胆酸3-硫酸盐(taurolithocholic acid 3-sulfate, TLC-S)处理大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,构建AP体外模型，以进一步探讨红景天苷的作用机制。采用Western blot检测AR42J细胞中焦亡相关蛋白、SIRT1及Nrf2的表达水平；使用LDH试剂盒评估AR42J细胞中LDH释放情况。使用SIRT1/Nrf2通路抑制剂EX527进行挽救实验。结果 与对照组相比，AP组大鼠血清中AMY、IL-1β和IL-18水平显著增加，胰腺组织出现大量炎性细胞浸润，可见片状坏死及出血现象，胰腺组织中焦亡相关的蛋白表达显著增加，SIRT1与Nrf2的蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与AP组相比，AP+红景天苷组大鼠血清中AMY、IL-1β和IL-18水平显著降低，并减轻胰腺组织的病理损伤。胰腺组织中焦亡相关蛋白的表达水平显著降低，SIRT1与Nrf2的表达显著增加(P<0.05)。体外实验结果显示，与TLC-S组相比，红景天苷显著降低AR42J细胞中焦亡相关蛋白的表达，增加SIRT1和Nrf2的表达，并减少LDH的释放(P<0.05)。挽救实验结果表明，SIRT1/Nrf2通路抑制剂EX527可显著逆转红景天苷对AR42J细胞焦亡的抑制作用(P<0.05)。结论 红景天苷可通过激活SIRT1/Nrf2信号通路，抑制胰腺腺泡细胞焦亡，从而减轻AP病理损伤。

关键词

胰腺炎 / 红景天苷 / 腺泡细胞 / 细胞焦亡