过表达SALL4促进人宫颈癌细胞系的迁移和侵袭

摘要

目的 研究婆罗双树样基因4(spalt-like transcription factor 4,SALL4)对人宫颈癌细胞系HeLa、SiHa迁移和侵袭的影响，并探讨其可能的分子机制。方法 利用分子克隆技术构建SALL4过表达质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo-SALL4,并转染至HeLa、SiHa细胞，通过新霉素(G418)筛选稳定过表达SALL4的HeLa、SiHa细胞株。采用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力，Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力；Western blot检测波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏素(E-cadherin)、Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、细胞因子信号抑制物1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)等的蛋白表达；real-time qPCR检测SOCS1、SALL4的mRNA水平；应用JAK/STAT通路抑制剂WP1066处理SALL4过表达的人宫颈癌细胞系，Western blot检测Vimentin、SOCS1等的表达情况。结果 与对照组相比，过表达SALL4的HeLa和SiHa细胞在48 h的划痕愈合率和Transwell小室迁移和侵袭穿膜细胞数均显著升高(P<0.05);过表达SALL4组的Vimentin、p-JAK2、p-STAT3蛋白水平明显升高(P<0.05),而SOCS1的蛋白水平和mRNA水平显著减低(P<0.05)。WP1066处理SALL4过表达的HeLa和SiHa细胞后，与二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)处理组比较，SOCS1蛋白水平明显升高(P<0.05),而Vimentin蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论 SALL4能促进人宫颈癌细胞系的迁移和侵袭，可能与靶向调控JAK/STAT信号通路有关。

关键词

宫颈肿瘤 / 迁移与侵袭 / JAK/STAT信号通路