LINC00324对黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制

摘要

目的 探讨LINC00324对黑色素瘤增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法 基于基因表达谱交互式分析平台(GEPIA)数据库分析LINC00324在黑色素瘤组织和癌旁组织中的表达水平以及对患者预后的影响。在黑色素瘤细胞株SK-MEL-2中转染LINC00324过表达载体和siRNA,并标记为过表达阴性对照组(NC组)、过表达组(OE组)、沉默阴性对照组(si-NC组)和沉默组(si-LINC00324组);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LINC00324转染效率以及Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA表达水平；CCK-8实验检测细胞增殖能力；划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell实验检测细胞侵袭能力；Western blot实验检测关键蛋白表达水平。结果 与癌旁组织相比，LINC00324在黑色素瘤组织中低表达(P<0.05),且低表达患者的预后较差。qRT-PCR结果显示，LINC00324的过表达载体和siRNA在黑色素瘤细胞中转染成功(P<0.01)。与NC组相比，OE组SK-MEL-2细胞增殖、迁移以及侵袭能力明显减弱(P<0.01);与si-NC组相比，si-LINC00324组SK-MEL-2细胞增殖、迁移能力提高(P<0.01)。与NC组相比，OE组细胞中Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA水平下调(P<0.01);与si-NC组相比，si-LINC00324组细胞中Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA水平上调(P<0.01)。Western blot结果显示，与NC组相比，OE组细胞中p62和Bcl-2的蛋白水平上调(P<0.05),LC3BⅡ蛋白水平下调(P<0.01);与si-NC组相比，si-LINC00324组细胞中p62和Bcl-2的蛋白水平下调(P<0.05),LC3BⅡ蛋白水平上调(P<0.05)。结论 LINC00324在黑色素瘤组织和细胞系中低表达，可以通过上调Bcl-2抑制自噬影响黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词

黑色素瘤 / LINC00324 / 自噬 / Bcl-2 / 细胞增殖 / 细胞迁移 / 细胞侵袭