GNA12通过激活ERK信号通路促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭迁移

摘要

目的 探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α亚基12(G protein subunit α 12,GNA12)对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法 利用GEPIA2、Human Protein Altas数据库预测GNA12在头颈部肿瘤中的表达情况，利用Keplan-Meier plotter数据库分析GNA12表达与头颈部肿瘤预后的关系。采用qRT-PCR实验检测正常鼻咽黏膜上皮细胞系(NP69)和鼻咽癌细胞系(CNE-2、5-8F、HK-1)中GNA12的表达水平。用携带si-GNA12和NC的干扰序列分别转染鼻咽癌细胞CNE-2和5-8F细胞系，构建敲低的细胞株(si-GNA12组)和对照细胞株(NC组)。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力，CCK-8和集落克隆实验检测细胞的增殖能力。采用Western blot实验检测上皮-间质转化中N-cadherin、E-cadherin、Snail以及Vimentin蛋白和ERK信号通路中ERK及p-ERK蛋白表达情况。结果 数据库结果显示，头颈部肿瘤组织中GNA12表达高于正常头颈部组织(P<0.05)。GNA12表达越高，预后越差(P<0.05)。与正常鼻咽黏膜上皮细胞相比，鼻咽癌细胞系中GNA12 mRNA表达水平较高(P<0.05)。与NC组相比，si-GNA12组GNA12 mRNA表达水平下降(P<0.05)。与NC组相比，si-GNA12组CNE-2和5-8F细胞的增殖、迁移和侵袭均受到抑制(P<0.05)。Western blot显示，与NC组相比，si-GNA12组N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达上升(P<0.05),ERK信号通路相关蛋白p-ERK蛋白表达下降(P<0.05)。结论 GNA12可能通过调控ERK信号通路促进鼻咽癌细胞的增殖和侵袭迁移。

关键词

鼻咽癌 / GNA12 / ERK信号通路 / EMT / 增殖