POSTN对人下咽癌细胞增殖、凋亡和EMT的影响

摘要

目的 研究骨膜蛋白(Periostin, POSTN)对人下咽癌细胞增殖、凋亡和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响和机制。方法 通过TIMER2数据库分析POSTN基因在头颈部肿瘤中的表达情况。培养人下咽癌FaDu细胞，构建转染si-POSTN的实验组(si-POSTN1组、si-POSTN2组、si-POSTN3组)和转染阴性对照序列si-NC的对照组(NC组),然后通过PCR实验筛选出POSTN基因敲低效率较高的两组，用于后续的实验。CCK-8和细胞集落形成实验检测增殖情况；划痕和Transwell实验检测迁移和侵袭能力；Western blot实验检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)和EMT相关蛋白(N-cadherin、E-cadherin、Vimentin、Snail)的表达情况；PCR实验检测TGF-β/Smad通路相关基因(TGF-β1、SMAD2、SMAD3)mRNA的表达情况。结果 PCR实验发现si-POSTN1组和si-POSTN2组POSTN mRNA表达量比si-POSTN3组低(P<0.05),故选择si-POSTN1和si-POSTN2序列进行后续实验。与NC组相比，si-POSTN1组和si-POSTN2组POSTN的蛋白表达量下降(P<0.001)。与NC组相比，si-POSTN1组和si-POSTN2组细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05)。与NC组相比，si-POSTN1组和si-POSTN2组凋亡相关蛋白Bax的表达量上升而Bcl-2的表达量减少(P<0.01),EMT相关蛋白E-cadherin的表达量增加而N-cadherin、Vimentin和Snail的表达量均减少(P<0.05)。与NC组相比，si-POSTN1组和si-POSTN2组TGF-β1、SMAD2、SMAD3的mRNA表达量均降低(P<0.01)。结论 POSTN会增强下咽癌细胞迁移、侵袭、增殖的能力，促进EMT的进程，抑制细胞凋亡，其机制可能是通过TGF-β/Smad通路来调控。

关键词

下咽癌 / POSTN / 上皮-间质转化 / 增殖 / 凋亡