奥拉帕利对内毒素致急性肺损伤小鼠的保护作用

摘要

目的 探讨奥拉帕利对内毒素致急性肺损伤小鼠的保护作用。方法 24只SPF级雄性C57BL/6小鼠，8～10周龄，体质量20～30 g,按随机数字表法分为4组(n=6):control组、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)组、5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组。LPS组、5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组采用1 mg/mL LPS雾化构建ALI模型，每天30 min,连续3 d。5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组在第3天雾化后，即刻分别腹腔注射5,10 mg/kg奥拉帕利；control组腹腔注射等量生理盐水。给药后观察小鼠行为改变等一般情况，并于给药后24 h后处死小鼠，检测肺湿/干重比；BCA法分别测定血清和肺泡灌洗液总蛋白的含量，计算肺通透性指数(lung pemeability index, LPI);ELISA法测肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β的浓度；酶比色法测肺组织脂质过氧化丙二醛(malondialdehyde, MDA)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的活性；HE染色测定肺组织损伤程度评分；免疫组化评估肺组织Caspase-1的表达水平。结果 腹腔注射奥拉帕利后可见小鼠均存活，精神较前无明显烦躁及萎靡，无恶心、呕吐、腹泻、食欲减退等症状。与control组比较，LPS组、5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组肺湿/干比、LPI显著升高(P<0.05),肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度显著升高(P<0.05),肺组织MDA的含量和MPO的活性显著升高(P<0.05),肺组织SOD的活性和T-AOC的含量显著下降(P<0.05),肺组织Caspase-1的表达水平显著升高(P<0.05),肺组织病理学损伤评分显著升高(P<0.05)。与LPS组比较，5 mg/kg奥拉帕利组和10 mg/kg奥拉帕利组肺湿/干比、LPI显著降低(P<0.05),肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度显著降低(P<0.05),肺组织MDA的含量和MPO的活性显著降低(P<0.05),SOD的活性和T-AOC的含量显著升高(P<0.05),Caspase-1的表达水平显著降低(P<0.05),肺组织病理学损伤评分显著降低(P<0.05)。与5 mg/kg奥拉帕利组比较，10 mg/kg奥拉帕利组肺湿/干比、LPI显著降低(P<0.05),肺组织和血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度显著降低(P<0.05),MDA的含量和MPO的活性显著降低(P<0.05),SOD的活性和T-AOC的含量显著升高(P<0.05),Caspase-1的表达水平显著降低(P<0.05),肺组织病理学损伤评分显著降低(P<0.05)。结论 腹腔注射奥拉帕利能够减轻内毒素致ALI小鼠肺部及全身炎症反应、肺水肿、肺组织损伤，降低肺组织氧化应激水平，通过抑制Caspase-1/IL-1β信号通路减轻细胞焦亡，且剂量为10 mg/kg时未见明显不良反应，疗效更佳。

关键词

奥拉帕利 / 急性肺损伤 / 细胞焦亡 / 氧化应激 / 脂多糖