SIRT3在皮肤鳞状细胞癌中的作用

摘要

目的 探索去乙酰化酶3(Sirtuin-3,SIRT3)对皮肤鳞状细胞癌的影响及潜在调控机制。方法 采用基因表达谱交互分析数据库(Gene Expression Profiling Interactive Analysis, GEPIA)分析SIRT3在多种肿瘤中的表达。采用SIRT3小干扰RNA转染A431细胞株构建SIRT3敲低细胞(si-SIRT3组),将阴性对照siRNA转染至A431细胞中，构建对照组细胞。采用RT-qPCR及Western blot分别检测细胞中SIRT3 mRNA及蛋白水平，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率、活性氧(reactive oxygen species, ROS)及膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)水平，采用Western blot检测细胞中促凋亡蛋白Bax、细胞色素C蛋白及抑凋亡蛋白Bcl-2的表达，采用CCK-8实验检测细胞的增殖。A431细胞分别用SIRT3抑制剂3-TYP处理(3-TYP组)和等量DMSO处理(对照组)后，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用转录组测序分析对照组和si-SIRT3组的差异表达基因，并对差异表达基因进行GO及KEGG富集分析。结果 SIRT3在胸腺瘤及弥漫性大B细胞淋巴瘤中表达上调(P<0.05)。相比于对照组，si-SIRT3组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),ROS释放增加(P<0.05),MMP明显降低(P<0.001),促凋亡蛋白Bax和细胞色素C蛋白表达上调，抑凋亡蛋白Bcl-2表达下调，细胞增殖受到抑制(P<0.001)。相比于对照组，3-TYP组细胞凋亡率增加(P<0.001)。转录组测序分析结果显示，对照组和si-SIRT3组细胞中差异表达基因共有94个，其中上调基因59个，下调基因35个，差异表达基因主要富集在代谢、信号转导、钙离子、蛋白转运、蛋白水解、胞外基质、金属内肽酶及激素分泌等信号通路中。结论 下调皮肤鳞癌细胞中SIRT3的表达，可以促进癌细胞凋亡，抑制增殖，SIRT3有望作为皮肤鳞癌患者新的治疗靶点。

关键词

皮肤鳞癌 / SIRT3 / 活性氧 / 细胞凋亡 / 线粒体膜电位