和胃降逆胶囊对胃腺癌细胞凋亡的影响及其机制

摘要

目的 以核转录因子-κB/上皮间充质转化(NF-κB/EMT)信号通路为基础，探讨和胃降逆含药血清对胃腺癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 制备不同药物剂量(3,6,12 g/kg)的和胃降逆含药血清，作为含药血清低、中、高剂量组，不含药物的血清作为空白对照组。采用不同药物剂量的和胃降逆含药血清分别干预AGS细胞24,48,72 h后，用CCK-8法观察细胞增殖；DAPI染色法检测细胞凋亡；划痕试验观察细胞迁移；实时定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测NF-κB、EMT标志物相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内NF-κB、E-cadherin、Vimentin相关信号通路蛋白的表达。结果 同一时间点，与空白对照组比较，和胃降逆含药血清组细胞活力降低(P<0.01);同一含药血清剂量组48,72 h与24 h比较细胞活力降低(P<0.05)。干预48 h,与空白对照组比较，不同剂量含药血清组AGS细胞凋亡率剂量依赖性增加(P<0.05)。与空白对照组比较，和胃降逆含药血清组划痕愈合速度均减慢，迁移率降低(P<0.05);干预24 h,与空白对照组比较，高剂量组细胞迁移降低(P<0.01),干预48 h,中、高剂量组细胞迁移率降低(P<0.01)。与空白对照组比较，和胃降逆含药血清组AGS细胞中NF-κB、Vimentin的mRNA水平剂量依赖性下调(P<0.05),E-cadherin的mRNA水平剂量依赖性上调(P<0.01)。与空白对照组比较，和胃降逆含药血清组AGS细胞中NF-κB、Vimentin的蛋白表达剂量依赖性下调，E-cadherin的蛋白表达剂量依赖性上调(P<0.05)。结论 和胃降逆胶囊可能通过抑制NF-κB活化、调控下游EMT相关蛋白的表达介导胃腺癌细胞AGS的迁移和侵袭，进而抑制AGS细胞增殖并促进其凋亡。

关键词

和胃降逆胶囊 / 胃腺癌 / NF-κB/EMT / E-cadherin / Vimentin