miR-92b-5p对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及其机制

摘要

目的 探讨miR-92b-5p在高糖诱导的足细胞损伤或凋亡过程中可能发挥的作用，并揭示其对线粒体功能的作用机制。方法 (1)体外培养足细胞，分为对照组(NG组)和高糖组(HG组),通过高通量测序技术筛选差异表达的miRNA。(2)为了观察miR-92b-5p对足细胞线粒体功能和足细胞凋亡的影响，将正常血糖条件下培养的足细胞分为NC mimics、miR-92b-5p mimics、NC inhibitor、miR-92b-5p inhibitor组。为了观察抑制miR-92b-5p表达能否通过改善线粒体功能减轻高糖诱导的足细胞凋亡，将足细胞分为NG组、HG组、HG+NC inhibitor组、HG+miR-92b-5p inhibitor组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定miR-92b-5p的表达，流式细胞术测定足细胞凋亡率，CCK-8法测定足细胞活力，Western blot测定凋亡相关蛋白和线粒体相关蛋白的表达。结果 (1)通过高通量测序技术，筛选出16个差异表达的miRNA,其中，HG组miR-92b-5p的表达明显升高(P<0.05)。(2)与NC mimics组相比，miR-92b-5p mimics组miR-92b-5p表达升高(P<0.05),足细胞活力降低(P<0.05),足细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达降低(P<0.05),Bax、Fis1表达增加(P<0.05)。与NC inhibitor组相比，miR-92b-5p inhibitor组miR-92b-5p表达降低(P<0.05),足细胞活力升高(P<0.05),足细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达升高(P<0.05),Bax、Fis1表达降低(P<0.05)。(3)与NG组相比，HG组miR-92b-5p表达升高(P<0.05),足细胞活力降低(P<0.05),足细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达降低(P<0.05),Bax、Fis1表达增加(P<0.05)。与HG+NC inhibitor相比，HG+miR-92b-5p inhibitor组miR-92b-5p表达降低(P<0.05),足细胞活力升高(P<0.05),足细胞凋亡率减少(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达升高(P<0.05),Bax、Fis1表达降低(P<0.05)。结论 在高糖条件下，miR-92b-5p的表达水平增加，而抑制miR-92b-5p的表达能够通过改善线粒体功能减轻高糖诱导的足细胞凋亡，从而延缓糖尿病肾病的进展。

关键词

miR-92b-5p / 微小RNA / 糖尿病 / 糖尿病肾病 / 足细胞凋亡 / 线粒体功能障碍