血红素加氧酶-1对哮喘模型中Th1/Th2/Th17/Treg亚群及相关细胞因子分泌格局的影响

摘要

目的 探讨血红素加氧酶-1对哮喘动物模型中Th1/Th2/Th17/Treg亚群及相关细胞因子分泌格局的影响。方法将Balb/C小鼠随机分为5组:正常对照组、卵清蛋白（OVA）组、氯化血红素（Hemin）组、锡原卟啉（SnPP）组、Hemin+SnPP组,每组10只。OVA组使用OVA对小鼠进行致敏和激发建立哮喘模型,其他3个干预组在OVA致敏和激发前2d及第27天分别给予Hemin、SnPP或同时给予Hemin和SnPP溶液腹腔注射。造模成功后通过肺组织病理切片及支气管肺泡灌洗液（BALF）炎症细胞分类计数观察哮喘动物模型气道炎症程度,流式细胞计数法检测脾脏CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞、CD4⁺IL-10R⁺IFN-γR⁺Treg1细胞和CD4⁺IL-17⁺Th17细胞的比例,ELISA方法检测血清及BALF中Th1/Th2/Th17/Treg相关细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-2、IL-17、TNF-α、IL-10和TGF-β的水平,免疫组化测定肺组织IL-17的表达。结果（1）与正常对照组比较,其他四组小鼠肺组织均有不同程度的炎症细胞浸润,其中OVA组小鼠最严重,Hemin组最轻。与正常对照组比较,OVA组小鼠BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞（EOS）明显增多,脾脏组织中CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞比例下降,CD4⁺IL-17⁺Th17细胞比例升高,血清中IL-4、TNF-α增多而IFN-γ、IL-2、IL-10和TGF-β减少,BALF中IL-17增多,肺组织IL-17阳性表达增多（均P<0.01）;Hemin组BALF中细胞总数和EOS增多,CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg、CD4⁺IL-10R⁺IFN-γR⁺Treg1和CD4⁺IL-17⁺Th17细胞比例升高（均P<0.01）,其余指标无明显变化;SnPP组和Hemin+SnPP组TNF-α以及Hemin+SnPP组CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg比例和IL-10水平差异无统计学意义,其余各指标变化趋势同OVA组（均P<0.01）。（2）与OVA组比较,Hemin组BALF中细胞总数和EOS明显减少,脾脏CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg细胞和CD4⁺IL-10R⁺IFN-γR⁺Treg1细胞比例均升高,CD4⁺IL-17⁺Th17细胞比例下降,除TGF-β外其他细胞因子变化差异均有统计学意义（均P<0.05）。其他两组变化趋势与OVA组基本相同,与Hemin组比较免疫失衡和炎症因子变化更明显。结论 血红素加氧酶-1在哮喘动物模型中可影响Th1/Th2/Th17/Treg细胞亚群的分化和功能以及相关细胞因子的分泌格局,发挥免疫调节功能。

关键词

哮喘 / 血红素加氧酶-1 / T细胞亚群 / 免疫调节 / 炎症 / 细胞因子