促炎细胞因子IL-1β和IL-6对人牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响

摘要

目的 探讨白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）对体外培养的人牙髓干细胞（hDPSCs）增殖和分化的影响。方法 体外分离培养hDPSCs，设置对照组（0 ng/mL IL-1β）和IL-1β组（0.1,1,10,100 ng/mL IL-1β）；同理设置对照组（0 ng/mL IL-6）和IL-6组（0.1,1,10,100 ng/mL IL-6）。培养24,48,72 h时，应用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测hDPSCs增殖活性；培养7,14,21 d时，应用5-溴-4氯-3-吲哚-磷酸盐（BCIP）/氯化硝基四氮唑蓝（NBT）碱性磷酸酯酶（ALP）显色试剂盒和茜素红（AR）显色试剂盒分别检测hDPSCs ALP染色、ALP活性、AR染色变化和钙结节定量。结果 CCK-8结果显示，不同浓度IL-1β组培养48 h细胞增殖活性均小于对照组（P<0.05）,72 h时仅100 ng/mL IL-1β组增殖活性小于对照组（P<0.05）。成骨诱导第14,21天时，与对照组比较，1,10,100 ng/mL IL-1β组肉眼观ALP和AR染色变浅，ALP活性和钙结节OD₄₅₀降低（P<0.05）。CCK-8结果显示，不同浓度IL-6组在48 h时细胞增殖活性均小于对照组（P<0.05）,72 h时仅100 ng/mL IL-6组增殖活性小于对照组（P<0.05）。成骨诱导第21天，与对照组相比，肉眼观100 ng/mL IL-6组ALP染色较浅，ALP活性降低（P<0.05）,0.1,1,10 ng/mL IL-6组在成骨诱导第7,14,21天，ALP染色、AR染色、ALP活性和钙结节OD₄₅₀均无明显变化。结论 IL-1β和IL-6对hDPSCs增殖活性的影响均取决于其浓度和作用时间。高浓度的IL-1β抑制hDPSCs的成骨分化；IL-6对hDPSCs的成骨分化无明显影响。

关键词

白细胞介素1β / 白细胞介素6 / 人牙髓干细胞 / 牙髓炎 / 增殖 / 成骨分化