基于NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路探讨肝复胶囊抗慢性肝损伤的作用机制

摘要

目的 研究肝复胶囊（Ganfu capsule,GFC）对CCl4诱导的慢性肝损伤（chronic liver injury,CLI）大鼠模型的影响及作用机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组（2×10-4 g/kg）及肝复胶囊低（GFC-L,0.781 3 g/kg）、中（GFC-M,1.562 5 g/kg）、高（GFC-H,3.125 g/kg）剂量组，每组10只。空白组不做处理，其余组大鼠均背部皮下注射40%CCl4花生油混合溶液造模，除首剂量按5 mL/kg外，每次注射剂量为3 mL/kg，每周2次，持续12周。造模4周后，给药组大鼠开始灌胃相应药物，空白组和模型组灌胃等量生理盐水，每日1次，持续8周。12周末，称量各组大鼠体质量后，处死大鼠，腹主动脉取血，收集大鼠肝脏。HE及Masson染色观察肝组织病理变化；生化试剂盒检测大鼠血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）;ELISA检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6水平；Western blot法检测各组大鼠肝组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis associated speck-like protein containing a caspase activating recruitment domain,ASC）、半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)蛋白表达。结果 与模型组比较，GFC各剂量组和秋水仙碱组大鼠体质量显著增加，肝组织炎症浸润及胶原蛋白沉积减少，血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低（P<0.05），肝组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达下调（P<0.05），高剂量GFC改善CLI大鼠疗效优于秋水仙碱。结论 GFC可能通过下调NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路，抑制炎症因子的表达，从而缓解CCl4诱导的肝脏炎症损伤，发挥保护肝脏作用。

关键词

肝复胶囊 / 慢性肝损伤 / NLRP3 / ASC / Caspase-1 / 炎症