SIRT1对CCM内皮细胞EndMT及细胞增殖和迁移的调节作用

摘要

目的 探讨沉默信息调节因子2同源物1(SIRT1)对脑海绵状血管畸形（CCM）内皮细胞中内皮-间充质转化（EndMT）相关转录因子及细胞表型的影响。方法 免疫荧光染色法检测正常脑组织和CCM病变组织血管内皮细胞SIRT1的表达。慢病毒转染方法敲低人脑微血管内皮细胞（hCMEC）中的PDCD10基因，构建CCM细胞模型。用SIRT1激动剂SRT-1720分别处理正常内皮细胞和CCM内皮细胞48 h，设立4个实验组：shBlank组、shBlank+SRT-1720组、shPDCD10组、shPDCD10+SRT-1720组。qPCR检测内皮细胞PDCD10敲低效率、SIRT1及EndMT相关转录因子（SNAI1、SNAI2、SNAI3、TWIST1、TWIST2）表达水平；Western blot分析PDCD10敲低效率及SIRT1的蛋白表达；EdU细胞增殖实验评估细胞增殖情况；细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 与正常脑组织相比，CCM病变组织中的内皮细胞SIRT1表达下调。与shBlank组比较，shPDCD10组PDCD10和SIRT1的mRNA及蛋白水平显著降低（P<0.05）,SNAI1、SNAI2、SNAI3、TWIST1的mRNA水平显著升高（P<0.05）,TWIST2的mRNA水平显著下降（P<0.05），细胞增殖和迁移能力显著增强（P<0.05）。与shPDCD10组相比，shPDCD10+SRT-1720组SIRT1的mRNA及蛋白水平显著上调（P<0.05）,SNAI2、SNAI3、TWIST1的mRNA水平显著降低（P<0.05）,TWIST2的mRNA水平显著升高（P<0.05），细胞增殖和迁移能力显著减弱（P<0.05）。结论 SIRT1抑制CCM内皮细胞中EndMT相关转录因子异常表达，减缓CCM内皮细胞的异常增殖和迁移，提示SIRT1可能成为治疗CCM的新靶点。

关键词

脑海绵状血管畸形 / SIRT1 / 内皮细胞 / 内皮-间充质转化 / 细胞增殖 / 细胞迁移