单克隆抗体药物中微量蛋白质含量测定方法的建立

摘要

目的 建立并验证一种测定单克隆抗体药物中微量蛋白质含量的方法。方法 采用高效液相色谱-荧光检测器（high performance liquid chromatography-fluorescence detector,HPLC-FLD）法建立单抗药物中蛋白质含量的检测方法，并对方法的专属性、线性、重复性、中间精密度、准确度和耐用性进行验证。结果 该方法专属性强。在250～750 ng进样量范围内，蛋白质进样量与峰面积呈良好的线性关系，决定系数R²>0.99。两名实验人员分别在3个工作日对同一份供试品溶液进行18次独立测定，其蛋白质含量的变异系数为3.03%，蛋白质含量验证溶液（550 ng）的回收率在90%～110%内。6次蛋白质含量验证溶液（550 ng）蛋白质含量测定值的RSD为2.88%。不同色谱柱检测蛋白质含量验证溶液（550 ng）的变异系数为1.86%。结论 成功建立了检测单克隆抗体药物中微量蛋白质含量的高效液相色谱法，该方法专属性强、重复性好、精密度及准确度高，可对单克隆抗体药物中微量蛋白质含量进行质量控制。

关键词

高效液相色谱 / 荧光检测器 / 单克隆抗体药物 / 微量 / 含量测定 / 质量控制