星点设计结合G1-熵权法优化藏柴胡和麦冬配伍比例及提取工艺

摘要

目的 基于成分-药效-毒理指标明确藏柴胡麦冬的最佳配伍比例及其提取工艺。方法 采用HPLC法检测藏柴胡中及其配伍麦冬后柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、柴胡皂苷c含量，色谱条件为：乙腈-水系统梯度洗脱，流速1.0 mL/min，检测波长210 nm，进样量20μL，柱温25℃。L02细胞分别用不同比例配伍及提取工艺所得藏柴胡-麦冬干预后，采用CCK-8检测细胞抑制率，采用ELISA法检测细胞上清LDH含量。采用CCl₄诱导大鼠肝损伤模型，给药干预后，采用ELISA法检测血清中ALT、AST、TBIL、ALP、γ-GT、TBA含量及肝组织中SOD、MDA、GSH-Px含量。实验设计以成分-药效-毒理为指标，以柴胡和麦冬用量比例、乙醇浓度、提取时间为因素，采用星点设计结合G1-熵权法优化配伍比例和提取工艺。结果 藏柴胡配伍麦冬后，藏柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、柴胡皂苷c的含量均不同程度降低（P<0.05）。与藏柴胡组比较，藏柴胡配伍麦冬组人正常肝L02细胞抑制率显著降低（P<0.05），细胞上清LDH含量显著降低（P<0.05）。与模型组比较，藏柴胡配伍麦冬组肝损伤大鼠血清中ALT、AST、TBIL、ALP、γ-GT、TBA水平降低（P<0.05），肝脏组织匀浆上清中SOD、GSH-Px水平升高（P<0.05）,MDA水平降低（P<0.05）。星点设计拟合的多元二项式拟合方程：Y=0.747+0.132X₁+0.057X₂+0.046X₃-0.028X₁～2+0.016X₂～2-0.076X₃～2-0.012X₁X₂-0.024X₁X₃-0.02X₂X₃（r=0.945 6）。最终确定配伍比例参数范围为：藏柴胡10～15 g，麦冬15～20 g；提取工艺参数范围为：乙醇浓度90%～95%，溶剂倍数8，提取时间80～100 min，提取2次。结论 藏柴胡配伍麦冬后对其指标成分溶出情况有一定影响。针对肝损伤模型，与单独使用藏柴胡比较，藏柴胡配伍麦冬后起到增效减毒的作用。

关键词

藏柴胡 / 麦冬 / 肝损伤 / 柴胡皂苷 / G1-熵权法 / 配伍比例 / 提取工艺