TRIM32在宫颈癌中的表达及其对HeLa细胞增殖、迁移及侵袭的影响

摘要

目的 探讨三结构域蛋白32(tripartite motif-containing proteins 32,TRIM32)在宫颈癌患者中的表达情况，及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭的影响及作用机制。方法 收集20例新鲜宫颈癌组织及癌旁正常组织，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测两种组织中TRIM32表达；同时收集85例患者宫颈癌及癌旁正常组织蜡块，免疫组化检测TRIM32表达量，统计患者临床病理资料，分析TRIM32表达与临床特征之间的相关性。采用qRT-PCR及Western blot检测人宫颈癌细胞系HeLa、MS751、SiHa及人正常宫颈上皮细胞HUCEC中TRIM32表达水平。人源宫颈癌HeLa细胞分为空白对照组（control组）、空载体组（si-NC组）、siRNA TRIM32干扰组（si-TRIM32组），采用qRT-PCR法检测转染效率。利用克隆形成实验、划痕愈合实验及Transwell实验分别检测HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力；Western blot检测JAK2/STAT3信号通路蛋白（pJAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Ki-67和c-Myc）表达情况。结果 qRT-PCR及Western blot检测发现，宫颈癌组织中TRIM32表达量明显较癌旁正常组织升高（P<0.05）。免疫组化同样发现，宫颈癌组织中TRIM32表达量明显高于癌旁正常组织（P<0.05），且TRIM32的表达与肿瘤大小、FIGO分期和淋巴结转移有关（P<0.05）。与HUCEC细胞相比，HeLa、MS751、SiHa细胞中TRIM32表达水平均升高（P<0.05）。si-TRIM32组TRIM32表达量明显低于control组及si-NC组（P<0.05），证明转染成功。与control组和si-NC组相比，si-TRIM32组HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力均显著降低（P<0.05）,p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Ki-67和c-Myc蛋白表达均显著降低（P<0.05）。结论 TRIM32在宫颈癌中表达显著增高。敲低TRIM32表达抑制HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力，这可能与抑制JAK2/STAT3信号通路进展相关。

关键词

TRIM32 / 宫颈癌 / 增殖 / 迁移 / 侵袭 / JAK2/STAT3信号通路