下调Pin1通过Akt/SREBP-1轴抑制宫颈癌细胞增殖

摘要

目的 探究下调肽基脯氨酰基顺反异构酶（Pin1）表达对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 利用TNMplot在线平台、R2基因组学分析和可视化平台（R2）分析Pin1与固醇调节元件结合转录因子1(SREBP1)mRNA在正常宫颈组织和宫颈癌组织中表达情况及两者相关性；免疫组化法检测宫颈癌组织和宫颈炎组织的临床标本中Pin1与SREBP-1蛋白的表达情况并分析其相关性；Western blot检测宫颈癌细胞和正常宫颈上皮细胞中Pin1的表达量。实验分为对照组（sh-NC）、Pin1敲减组A(shPin1-A)和Pin1敲减组B(shPin1-B)，用慢病毒转染人子宫颈鳞癌细胞（SiHa）构建低表达Pin1的稳转细胞系，用Western blot测定细胞中Pin1的表达水平以验证转染效率。采用细胞计数试剂（CCK-8）和流式细胞术检测Pin1下调后SiHa细胞的增殖能力和凋亡水平。用Western blot检测细胞中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、SREBP1及凋亡和增殖相关蛋白Bax、Bcl-2和c-Myc的表达。结果 TNMplot和R2分析结果显示，相较正常宫颈组织，宫颈癌组织中Pin1和SREBP1的mRNA均呈高表达（P<0.05）。免疫组化结果显示，相较宫颈炎组织，宫颈癌组织中Pin1和SREBP1均高表达且两者呈正相关（r=0.652,P<0.05）。Western blot结果显示，Pin1蛋白在宫颈癌SiHa细胞中表达最高（P<0.05）。与sh-NC组比较，shPin1-A组和shPin1-B组Pin1、p-Akt、SREBP-1、c-Myc、BCL-2蛋白表达量减少（P<0.05）,Bax蛋白表达量增多（P<0.05）。与shNC组比较，shPin1-A组和shPin1-B组细胞增殖能力显著降低（P<0.05），细胞总凋亡率显著增加（P<0.05）。结论 下调Pin1可通过Akt/SREBP1信号轴抑制宫颈癌细胞的增殖，并诱导宫颈癌细胞凋亡，提示Pin1可能是治疗宫颈癌的潜在靶点。

关键词

宫颈癌 / Pin1 / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / Akt / SREBP1