磁力负载下牙周膜干细胞对细胞外基质重塑的标准化评估

摘要

目的 探究磁力负载下牙周膜干细胞（PDLSCs）对细胞外基质（ECM）重塑的标准化评估方法。方法 采用异硫氰酸荧光素（FITC）标记鼠尾胶原纤维并制备胶原凝胶，用激光共聚焦显微镜的荧光模式（CFM）和反射模式（CRM）观察同一焦平面下胶原纤维的形态变化。将PDLSCs混入FITC标记的胶原溶液中，制备ECM支架，并通过对支架施加单轴静态磁拉伸构建磁力负载平台。实验分为2组：对照组（未施加拉伸）和拉伸组（施加持续拉伸），染色细胞骨架后，观察对照组和拉伸组细胞排列方式；使用免疫荧光染色法标记人Ⅰ型胶原蛋白，观察并计算在持续拉伸第1,7,14,21天ECM支架重塑率和新生Ⅰ型胶原蛋白的排列百分比，评估PDLSCs对ECM支架的重塑效果。结果 无论在CFM还是CRM下均观察到清晰的胶原纤维，并且同一焦平面下的胶原纤维形态相似。与对照组相比，拉伸组中PDLSCs的排列角度更趋向于0°（P<0.05）。与对照组相比，拉伸组ECM重塑率在第14和21天显著增加（P<0.05），新生Ⅰ型胶原蛋白的排列百分比显著增加（P<0.05）。结论 本实验构建了一个可同时实现磁力拉伸和ECM示踪的磁力负载平台，为量化PDLSCs对ECM的重塑提供了一种标准化评估方法，为促进牙周膜纤维有序再生提供理论参考。

关键词

磁力负载 / 牙周膜干细胞 / 细胞外基质支架 / 标准化评估 / 细胞排列 / 胶原蛋白