降钙素受体样受体对子痫前期胎盘滋养细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的 探究降钙素受体样受体（CRLR）对子痫前期胎盘滋养细胞增殖和侵袭的影响。方法 将人绒毛膜滋养层细胞（HTR-8/SVneo细胞）分为NC组、H/R组、H/R+NC-oe组、H/R+CRLR-oe组、H/R+NC-sh组和H/R+CRLR-sh组。NC组HTR-8/SVneo细胞进行48 h的常规培养，其他组除H/R组外，HTR-8/SVneo细胞经qRT-PCR和Western blot验证转染效率后进行48 h缺氧/复氧（H/R）处理。采用CCK-8法检测细胞相对活力，EdU染色检测细胞EdU阳性率，TUNEL染色检测细胞凋亡率（TUNEL阳性率），Transwell法检测细胞侵袭数量。DCFH-DA法测量细胞中ROS浓度，TBA法检测MDA含量，WST-8法检测SOD活性，采用DTNB法检测GSH-Px活性。采用qRT-PCR检测CRLR mRNA水平，采用Western blot检测CRLR、凋亡相关蛋白（Bcl-2、cleaved Caspase-3）、抗凋亡通路蛋白（p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt）、侵袭相关蛋白（MMP2和MMP9）表达水平。结果 与NC组相比，H/R组相对细胞活力、EdU阳性率和侵袭细胞数量降低（P<0.05）,TUNEL阳性率升高（P<0.05）;Bcl-2、MMP2和MMP9蛋白水平降低（P<0.05）,cleaved Caspase-3蛋白水平升高（P<0.05）;ROS相对荧光强度和MDA水平升高（P<0.05）,SOD和GSHPx水平降低（P<0.05）;PI3K和Akt蛋白磷酸化相对水平降低（P<0.05）。与H/R+NC-oe组相比，H/R+CRLR-oe组细胞相对活力、EdU阳性率和侵袭细胞数量升高（P<0.05）,TUNEL阳性率降低（P<0.05）;Bcl-2、MMP2和MMP9蛋白水平升高（P<0.05）,cleaved Caspase-3蛋白水平降低（P<0.05）;ROS相对荧光强度和MDA水平降低（P<0.05）,SOD和GSH-Px水平升高（P<0.05）;PI3K和Akt蛋白磷酸化相对水平升高（P<0.05）。与H/R+NC-sh组相比，H/R+CRLR-sh组细胞相对活力、EdU阳性率和侵袭细胞数量降低（P<0.05）,TUNEL阳性率升高（P<0.05）;Bcl-2、MMP2和MMP9蛋白水平降低（P<0.05）,cleaved Caspase-3蛋白水平升高（P<0.05）;ROS相对荧光强度和MDA水平升高（P<0.05）,SOD和GSH-Px水平降低（P<0.05）;PI3K和Akt蛋白磷酸化相对水平降低（P<0.05）。结论 上调CRLR可促进子痫前期细胞增殖和侵袭，抑制细胞凋亡，其机制与激活PI3K/Akt信号通路有关。

关键词

降钙素受体样受体 / 子痫前期 / 胎盘滋养细胞 / 增殖 / 侵袭 / 凋亡 / 磷脂酰肌醇3激酶 / 蛋白激酶B