葛根素通过调控USP25信号保护脓毒症诱导的H9c2心肌细胞损伤

摘要

目的 探讨葛根素（puerarin, Pue）在脂多糖（LPS）诱导的H9c2心肌细胞损伤中的作用及机制。方法 采用LPS处理H9c2细胞模拟脓毒症心肌损伤，并随机分为4组：正常对照组（control组）、LPS组、Pue+LPS组和Pue+si-USP25+LPS组。观察细胞形态、检测细胞活力和细胞凋亡反映细胞损伤程度，RT-PCR检测TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平，DCFH-DA染色检测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）含量，ELISA检测LDH、CAT和SOD活性以及MDA含量，Western blot检测cleaved caspase-3、Cytochrome C、USP25和NF-κB的表达，免疫荧光染色检测USP25的表达情况。结果 与control组相比，LPS组H9c2细胞肿胀，密度减小，细胞活力、CAT和SOD活性降低（P<0.01）,MDA和ROS含量增加（P<0.01）,cleaved caspase-3和Cytochrome C表达增加（P<0.01）,TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平增加（P<0.01）,USP25表达降低（P<0.01）,NF-κB的表达增加（P<0.01）；与LPS组相比，Pue+LPS组H9c2细胞肿胀减轻，密度增加，细胞活力、CAT和SOD活性升高（P<0.01）,MDA和ROS含量降低（P<0.01）,cleaved caspase-3和Cytochrome C表达降低（P<0.01）,TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平降低（P<0.01）,USP25表达增加（P<0.01）,NF-κB的表达降低（P<0.01）；与Pue+LPS组相比，Pue+si-USP25+LPS组上述指标变化被逆转。结论 Pue通过激活USP25信号抑制炎症反应和氧化应激，改善细胞活力，减轻LPS引起的H9c2细胞损伤。

关键词

葛根素 / 脓毒症 / USP25 / 炎症反应 / 氧化应激 / 心肌损伤