基于Shh/Ptch1通路探讨艾司氯胺酮对脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响

摘要

目的 探究艾司氯胺酮（EST）调节音猬因子（Shh）/补缀同源物1(Ptch1)通路对脑缺血再灌注（CIR）大鼠认知功能的影响。方法 利用线栓法建立CIR大鼠模型，并随机分为CIR组、EST低剂量组、EST高剂量组、EST高剂量+Shh阻断剂（Cyclopamine）组，每组12只；再取12只正常大鼠仅进行结扎，不插入线栓作为假手术组。EST低、高剂量组分别于尾静脉注射30,60mg/kg EST，再腹腔注射等量生理盐水；EST高剂量+Shh阻断剂组于尾静脉注射60 mg/kg EST再腹腔注射10 mg/kg的Shh阻断剂。假手术组和CIR组注射等量生理盐水。治疗每天一次，持续28 d。末次给药后，神经系统症状评分（NSS）评估大鼠神经损伤情况；采用Morris水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期以评估大鼠认知功能；HE染色观察脑海马组织病理变化；TUNEL染色检测海马组织细胞凋亡；ELISA检测海马组织中白细胞介素-6(IL-6)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)水平；Western blot检测海马组织中Shh、Ptch1蛋白表达。结果 与CIR组比较，EST低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、NSS评分、细胞凋亡率、IL-6、CXCL10水平降低，Shh、Ptch1蛋白水平升高（均P<0.05），且EST高剂量组上述指标改善作用优于低剂量组（P<0.05）；与EST高剂量组比较，EST高剂量+Shh阻断剂组大鼠逃避潜伏期、NSS评分、细胞凋亡率、IL-6、CXCL10水平升高，Shh、Ptch1水平降低（均P<0.05）。结论 EST可能通过激活Shh/Ptch1信号通路缓解CIR大鼠的神经炎症，并改善其认知功能。

关键词

艾司氯胺酮 / 音猬因子 / 补缀同源物1 / 脑缺血再灌注 / 认知功能 / Shh/Ptch1通路 / 大鼠