LINC02589通过m6A介导的子宫内膜异位症FTO抑制促进上皮-间充质转化

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC02589和脂肪质量与肥胖相关蛋白（FTO）在子宫内膜异位症（EMs）中的表达及其与m6A甲基化水平的关系，揭示LINC02589和FTO在EMs病理过程中的潜在作用。方法 收集10例EMs患者和10例健康对照者的子宫内膜组织样本，通过qRT-PCR检测LINC02589、FTO的表达水平，MeRIP-qPCR检测LINC02589的m6A甲基化水平，Western blot检测FTO及m6A蛋白表达水平。正常子宫内膜基质细胞（ESCs）分为ESCs组和ESCs+17β-雌二醇组（ESCs+17β-E）。ESCs分别进行LINC02589沉默、FTO过表达及17β-雌二醇处理，命名为：Vector+siNC组、Vector+siNC+17β-E组、Vector+siLINC02589+17β-E组、FTO+siNC+17β-E组、FTO+siLINC02589+17β-E组，检测LINC02589、FTO及m6A甲基化水平。此外，通过Western blot检测FTO、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和β-catenin的蛋白表达，Transwell及CCK-8实验检测细胞迁移、侵袭及增殖情况。结果 与健康对照相比，EMs患者组织中LINC02589表达显著升高（P<0.001）,FTO表达显著降低（P<0.001），且m6A甲基化水平升高（P<0.001）,LINC02589与FTO表达呈负相关（r=-0.835 9,P<0.001）。在细胞实验中，ESCs+17β-E组较ESCs组LINC02589表达和m6A甲基化水平升高（P<0.001）,FTO表达降低（P<0.001）；与Vector+siNC+17β-E组相比，Vector+siLINC02589+17β-E组和FTO+siNC+17β-E组m6A甲基化水平显著降低（P<0.001）；此外，FTO+siNC+17β-E组较Vector+siNC+17β-E组E-cadherin表达升高（P<0.001）,N-cadherin、Vimentin和β-catenin表达降低（P<0.001），而FTO+siLINC02589+17β-E组这一效应被逆转（P<0.001）。功能实验表明，FTO+siNC+17β-E组细胞迁移、侵袭和增殖能力较Vector+siNC+17β-E组显著减弱（P<0.01），而FTO+siLINC02589+17β-E组这些指标可部分恢复（P<0.001）。结论 LINC02589通过负调控FTO表达促进m6A甲基化，从而介导雌激素诱导的EMs发生发展。

关键词

子宫内膜异位症 / LINC02589 / 脂肪质量和肥胖相关蛋白 / m6A甲基化 / 雌激素 / 上皮-间质转化