靶向组织因子的抗体偶联药物的质量控制

摘要

目的 研究并建立靶向组织因子的抗体偶联药物（anti-TF-ADC）的关键质量属性（CQA）质量控制方法。方法 从肽图鉴别、纯度和杂质、电荷异质性和活性等方面对anti-TF-ADC药物开展质量控制研究。采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）技术对anti-TF-ADC药物进行肽图鉴别；采用分子排阻色谱法（SEC）和十二烷基硫酸钠毛细管电泳法（CE-SDS）分析anti-TFADC药物的纯度；采用毛细管等电聚焦电泳法（icIEF）分析anti-TF-ADC药物的电荷异质性；采用疏水相互作用色谱法（HIC）分析anti-TF-ADC药物的药物抗体偶联比（DAR）；采用RP-HPLC分析anti-TF-ADC药物的游离细胞毒素残留；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、均相酶联免疫分析技术（AlphaLISA）和细胞增殖抑制法分析anti-TF-ADC药物的结合活性和生物学活性。结果对于anti-TF-ADC药物，肽图可识别其关键肽段，发挥特异性鉴别作用。经SEC和CE-SDS检测，其纯度分别为98.89%和97.99%。经icIEF检测，其主峰、酸性峰和碱性峰的面积百分比分别为61.73%,29.24%和9.03%。经HIC检测，其DAR值为3.92，以DAR4为主（49.2%）。经RP-HPLC检测，其游离细胞毒素残留均未检测出。anti-TF-ADC药物的结合活性和生物学活性测定所得数据均符合四参数方程式，其Fab端与靶点结合的EC₅₀值为13.13 ng/mL，其Fc端与Fc受体CD16a、CD32a和CD64结合的EC₅₀值分别为2 695.83,14 517.67,191.73 ng/mL，其细胞生物学活性的EC₅₀值为18.95 ng/mL。结论 针对anti-TFADC药物的理化和生物学特性，研究并建立了针对其CQA的质量控制方法，从质量可控的角度确保该类产品的临床安全性和有效性。

关键词

组织因子 / 抗体偶联药物 / 细胞毒素 / 关键质量属性 / 药物抗体偶联比 / 质量控制