根皮苷通过抑制NHE活性减轻AngⅡ诱导的细胞钙超载

摘要

目的 探讨根皮苷（Phl）减轻钙超载的作用机制。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为5组（每组n=6）：空白组（Ctrl组）、溶剂组（DMSO组）、模型组（AngⅡ组）、根皮苷干预组（AngⅡ+Phl组）以及NHE激动剂组（AngⅡ+Phl+LiCl组）。除空白组和DMSO组外，其余各组均接受AngⅡ诱导心肌肥大，随后进行为期28 d的相应灌胃处理。通过超声心动图、心脏质量/体质量比（HW/BW）及HE染色评估心脏结构。采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测心房钠尿肽（ANP）和脑钠肽（BNP）的mRNA水平，比色法测定钙含量，半合成萘荧光素-1(SNARF-1)法检测心肌细胞内pH值的恢复率，并通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）及其磷酸化（p-CaMKII）的表达。结果 与DMSO组相比，AngⅡ组大鼠舒张末期左室后壁厚度（LVWPT）明显增大（P<0.05），而左室舒张末期内径（LVDd）、左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短分数（LVFS）均明显减小（P<0.05）,HW/BW显著增加（P<0.01），心肌纤维呈现断裂与排列紊乱，ANP和BNP的mRNA水平、钙离子含量以及CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表达量均升高（P<0.05），而pH恢复率明显下降（P<0.01）。与AngⅡ组相比，AngⅡ+Phl组大鼠的LVWPT明显减少（P<0.05）,LVDd、LVEF和LVFS明显升高（P<0.05）,HW/BW明显降低（P<0.05），心肌纤维排列较为整齐，ANP和BNP的mRNA表达量、钙离子含量以及CaMKⅡ和p-CaMKⅡ的蛋白表达量均显著降低（P<0.05）,pH恢复率明显上升（P<0.01）。而与AngⅡ+Phl组相比，AngⅡ+Phl+LiCl组大鼠的LVWPT显著增加（P<0.05）,LVDd、LVEF和LVFS明显减小（P<0.05）,HW/BW明显增加（P<0.05），心肌纤维排列紊乱，ANP和BNP的mRNA表达量、钙离子含量、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ的蛋白表达量明显增加（P<0.05）,pH恢复率明显下降（P<0.05）。结论 Phl通过抑制NHE活性，减轻钙超载，从而抑制AngⅡ诱发的大鼠心肌肥厚，而NHE激动剂LiCl可逆转这一效应。

关键词

根皮苷 / AngⅡ / 心肌肥厚 / 钠-氢交换 / 钙超载 / 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ