不同剂量TNBS诱导溃疡性结肠炎大鼠模型比较研究

摘要

目的 通过比较不同剂量2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导溃疡性结肠炎（UC）模型的效果，筛选出建立UC模型的合适剂量。方法 SD大鼠随机分正常组、TNBS-50 mg/kg组和TNBS-100 mg/kg组（每组n=18，雌雄各半）。造模前禁食12 h，麻醉后模型组分别灌肠0.4 mL和0.8 mL 5%TNBS-乙醇溶液，正常组灌肠0.8 mL生理盐水。每日监测体质量、粪便隐血进行疾病活动指数（DAI）评分；造模后第1,7,14天每组处死6只大鼠，检测血清D-乳酸、粪便白蛋白，测量结肠长度及脾、胸腺质量，HE和AB-PAS染色观察结肠组织。结果 与正常组相比，TNBS-50 mg/kg组和TNBS-100 mg/kg组造模第1～4天体质量显著下降、DAI评分升高，4 d后体质量下降趋缓、黏液脓血便减轻、DAI评分降低；14 d内两组死亡率分别为5.6%和27.8%。与正常组相比，造模第1天，TNBS-50 mg/kg组和TNBS-100 mg/kg组出现结肠缩短、脾脏系数升高（均P<0.05），血清D-乳酸和粪便白蛋白升高（P<0.05）；第7天，50 mg/kg组出现结肠缩短、粪便白蛋白升高（P<0.05），且50 mg/kg组和100 mg/kg组表现为胸腺系数降低（P<0.05），血清D-乳酸升高（P<0.05）；第14天，50 mg/kg组上述指标仍异常（P<0.05）,100 mg/kg组除D-乳酸升高外与正常组无差异。病理组织学结果显示，TNBS-50 mg/kg组和TNBS-100 mg/kg组造模第1天结肠见明显炎症区域，伴黏膜下层水肿、杯状细胞部分破坏及黏液层损伤；第7天炎症进一步加重，上皮细胞被炎性细胞取代，炎细胞浸润至肌层，杯状细胞几乎消失；第14天病变区域均见恢复趋势，但100 mg/kg组恢复更显著。结论 5%TNBS-乙醇溶液按50 mg/kg剂量诱导UC模型，具有死亡率低、结肠炎症状及病理改变明显且持续时间长的显著优势，是建立UC模型的较佳造模条件。

关键词

溃疡性结肠炎 / 2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)剂量 / 大鼠 / 动物模型 / 死亡率