miR214在造影剂所致急性肾损伤中的作用及机制

摘要

目的 检测miR214在造影剂所致急性肾损伤（CI-AKI）患者中的表达水平，并探讨其在CI-AKI细胞损伤中的分子机制。方法 本研究共纳入10例CI-AKI患者作为CI-AKI组，并选取10例健康体检者作为对照组，采用qPCR检测两组血浆样本中miR214的表达水平，采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达水平。随后，将细胞分为4组：对照组、miR NC组、miR214组及miR214+Teplinovivint(Wnt/β-catenin通路抑制剂)组。以10 mg/mL碘佛醇刺激上述4组细胞建立体外CIAKI模型。采用qPCR检测miR214的表达水平，Western blot法检测Bax、Bcl-2及Wnt/β-catenin通路相关蛋白WNT、β-catenin和c-MYC的表达水平；ELISA法检测肾损伤标志物KIM-1和NGAL表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 与健康对照相比，CI-AKI患者中miR214表达显著上调，Bax蛋白表达增加而Bcl-2下降（均P<0.05）。细胞实验结果显示，与对照组相比，miR214组及miR214+Teplinovivint组细胞凋亡率升高，KIM-1和NGAL水平上升（P<0.05），而miR NC组无显著变化。Western blot结果显示，相较于对照组，miR NC组无明显变化，而miR214组及miR214+Teplinovivint组Wnt/β-catenin通路相关蛋白WNT、c-MYC和β-catenin表达量下降（P<0.05）；且相较于miR214组，miR214+Teplinovivint组Wnt和β-catenin表达量更低（P<0.05）,c-MYC的表达量无明显差异。结论 miR214可能通过抑制Wnt/β-catenin通路促进细胞凋亡介导了CI-AKI的发生。

关键词

CI-AKI / HK-2细胞 / miR214 / Wnt/β-catenin通路 / 细胞凋亡