非法染色延胡索指标成分快速检测模型的构建及其对镇痛疗效的影响

Construction of a rapid detection model for components in illegally dyed Rhizoma Corydalis and its effect on analgesic efficacy

摘要

目的 应用近红外光谱技术建立非法染色延胡索的定性鉴别模型及多种成分的定量快速检测模型，并分析不同浸染程度导致指标成分改变后其镇痛活性的变化。 方法 制备不同程度金胺O染色的延胡索样品。采用HPLC法同时测定延胡索中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素成分的含量，并以其测定值作为建模参比，以积分球漫反射模式采集所有样品的近红外光谱，采用相似性判别分析建立定性模型，采用偏最小二乘法（PLS）建立成分定量模型。从小鼠醋酸扭体反应、小鼠热板法镇痛和缩宫素诱发大鼠痛经模型方面考察不同浸染程度的延胡索的镇痛活性。 结果 通过多元散射校正（MSC）标准化处理，在4 500~8 500 cm^-1能够较好地区分染色和未染色的延胡索，内部验证的准确率达100%，外部验证准确率达到100%。延胡索乙素定量模型选取4 000~6 000 cm^-1和7 000~8 000 cm^-1波段图谱，经MSC处理，模型R²、交叉验证均方根误差（RMSECV）、预测均方根误差（RMSEP）依次为0.984 4，0.341 2，0.355 6；盐酸小檗碱定量模型选取4 000~5 500 cm^-1和7 000~8 000 cm^-1波段图谱，经标准正态变量校正（SNV）处理，模型R²、RMSECV、RMSEP依次为0.973 5，0.513 7，0.548 5；盐酸巴马汀定量模型选取5 000~6 000 cm^-1和7 000~8 000 cm^-1波段图谱，经MSC处理，模型R²、RMSECV、RMSEP依次为0.961 1，0.321 1，0.336 5。延胡索经金胺O乙醇溶液浸染时间达到5 min或者金胺O浓度超过2%时，延胡索对小鼠的镇痛效果显著降低；延胡索经金胺O乙醇溶液浸染时间达到10 min或者金胺O浓度超过2%时，延胡索对大鼠的镇痛效果显著降低。 结论 近红外光谱技术可100%鉴别非法染色延胡索，并实现盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素的快速定量检测；金胺O浸染≥5 min或浓度≥2%时，延胡索镇痛活性显著下降，故应禁用该染料对延胡索进行染色。

Abstract

Objective To establish qualitative identification models for illegally dyed Rhizoma Corydalis and rapid quantitative detection models for multiple components by means of near-infrared spectroscopy， and analyze the changes in analgesic activity of Rhizoma Corydalis caused by altered index components under different dyeing degrees. Methods Samples of Rhizoma Corydalis stained with different degrees of Auramine O were prepared. HPLC was used to simultaneously determine the contents of berberine hydrochloride， palmatine hydrochloride， and tetrahydropalmatine in Rhizoma Corydalis， and their measured values were used as modeling reference. The near-infrared spectra of all samples were collected using an integrating sphere diffuse reflectance mode. Similarity discriminant analysis was used to establish a qualitative model， and partial least squares（PLS） was used to establish a quantitative model for the components. The analgesic activity of Rhizoma Corydalis with different degrees of immersion was investigated from three aspects： acetic acid writhing reaction in mice， hot plate analgesia in mice， and oxytocin-induced dysmenorrhea rat model. Results After MSC standardization， stained and unstained Rhizoma Corydalis were well distinguished in the range of 4 500-8 500 cm^-1， with an internal validation accuracy of 100% and an external validation accuracy of 100%. The quantitative model of tetrahydropalmatine was selected in the spectral bands of 4 000-6 000 cm^-1 and 7 000-8 000 cm^-1； after MSC processing， the R²， RMSECV， and RMSEP of the models were 0.984 4， 0.341 2， and 0.355 6， respectively. The quantitative model of berberine hydrochloride was selected in the bands of 4 000-5 500 cm^-1 and 7 000-8 000 cm^-1； after SNV treatment， the R²， RMSECV， and RMSEP of the models were 0.973 5， 0.513 7， and 0.548 5， respectively. The quantitative model of palmatine hydrochloride was selected with spectral bands of 5 000-6 000 cm^-1 and 7 000-8 000 cm^-1； after MSC treatment， the R²， RMSECV， and RMSEP of the models were 0.961 1， 0.321 1， and 0.336 5， respectively. When the soaking time of Rhizoma Corydalis with Auramine O ethanol solution reached 5 min or the concentration of Auramine O exceeded 2%， the analgesic effect of Rhizoma Corydalis on mice was significantly reduced. When the soaking time of Rhizoma Corydalis with auramine O ethanol solution reached 10 min or the concentration of auramine O exceeded 2%， the analgesic effect of Rhizoma Corydalis on rats was significantly reduced. Conclusion Near-infrared spectroscopy achieves complete discrimination of illegally dyed Rhizoma Corydalis， and rapid detection of berberine hydrochloride， palmatine hydrochloride， and tetrahydropalmatine. When Rhizoma Corydalis is dyed with Auramine O for 5 min or longer， or at a concentration of 2% or higher， its analgesic activity is significantly reduced， thus， the dye for Rhizoma Corydalis should be strictly prohibited.

Graphical abstract

关键词

延胡索 / 近红外光谱技术 / 延胡索乙素 / 定性分析 / 定量分析 / 镇痛活性

Key words

Rhizoma Corydalis / near-infrared spectroscopy / tetrahydropalmatine / qualitative analysis / quantitative analysis / analgesic activity

目前中药饮片质量参差不齐，非法染色仍然是迄今为止影响中药质量的主要原因之一，不仅掩饰了伪劣中药的表观特征，同时减少了指标成分的含量，带入毒性染色成分，严重影响中药的质量和临床合理应用，破坏中药市场良性发展^［1，2］。延胡索为临床常用药物，具有活血散淤、利气止痛的功能，主治心腹腰膝疼痛、跌打损伤、淤血作痛、月经不调等症，是一味传统的止痛药^［3，4］。以质硬而脆，断面黄色，角质样，有蜡样光泽，气微，味苦者质量为佳。个别商家常常以高度乙醇浸提过的延胡索或者伪劣品经黄色染料浸染后，以次充好，谋取利润。考虑到延胡索用量较大，常规定性、定量检测方法成本高的问题，基层医院及一线验收人员亟需一套便捷、高效、可行且精准的检测手段，以实现对大批量入库中药饮片质量的定性定量分析。该检测方案需满足现场快速操作的需求，确保在中药饮片验收环节能够高效完成质量把控，为临床用药安全提供坚实的技术支撑^［5，6］。傅立叶变换近红外光谱仪的光谱吸收强度与组分含量之间存在明确的数学关联。在科学采集样本的前提下，通过构建精准的分析模型，可实现对中药质量的快速定性鉴别与定量检测。该技术凭借其高效性与可靠性，为中药质量控制提供了一种便捷的现代化检测手段，能够满足中药生产、流通及验收环节的快速检测需求^［7，8］。为有效解决当前延胡索染色乱象对中药质量和临床疗效的严重威胁，本研究创新性融合色谱与光谱技术开展系统性研究：通过人工制备不同金胺O浸染程度的延胡索样本，采用高效液相色谱法（HPLC）精准测定盐酸小檗碱、盐酸巴马汀及延胡索乙素三大关键指标成分的含量，以此作为建模的参比标准；同时以积分球漫反射模式采集所有样本的近红外光谱数据，运用相似性判别分析构建非法染色延胡索的高灵敏度定性鉴别模型，并结合偏最小二乘法（PLS）建立上述3种成分的高精度定量分析模型，同步关联不同染色程度下延胡索指标成分变化与其镇痛活性的关系，为染色延胡索的快速识别、质量控制及临床疗效评估提供技术支撑。

1 仪器与材料

1.1 实验动物

110只SPF级SD大鼠，雌雄各半，体质量（200±20）g；110只SPF级昆明小鼠，雌雄各半，体质量（20±2）g。均购自斯贝福（北京）生物技术有限公司，质量合格证号：11401500040462，生产许可证号：SCXK（京）2016-0002。动物实验经山西省中医药研究院伦理委员会批准（SZYLY2024KY-0802）。

1.2 药物

实验用延胡索购自安徽亳州中药材市场，经山西省中医药研究院主任药师王世伟鉴定为罂粟科植物延胡索（Corydalis rhizoma W.T.Wang）的干燥块茎。对照品盐酸小檗碱（批号：120164-202210）、盐酸巴马汀（批号：120232-202176）和延胡索乙素（批号：122830-202214）均购于中国食品药品检定研究院，各对照品质量分数均>98.0%，符合定量测定要求。乙腈（色谱纯，美国Fisher公司）；色谱用水为超纯水；其余试剂为分析纯或色谱纯。苯甲酸雌二醇注射液（批号：20211014，2 mg/mL）购自通用药业股份有限公司；缩宫素注射液（批号：11211053，5 U/mL）购自马鞍山丰原制药有限公司。NO试剂盒（批号：202201323，96t）、MDA试剂盒（批号：202305634，96t）、SOD试剂盒（批号：202305002，96t）、GSH-PX试剂盒（批号：202213734，96t）均购自南京建成试剂有限公司。

1.3 仪器

Antaris Ⅱ型傅立叶变换近红外光谱仪，配有积分球漫反射采样系统和样品旋转台，附带TQ Analyst分析软件（美国Thermo公司）；Agilent 1200高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；XSE105DU电子天平（德国Sartorius公司）；S100H型超声提取仪（德国Elma公司）。全自动生化分析仪AU5841（美国Beckman Coulter）；低速KDC-1044离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）。

2 方法与结果

2.1 同时测定盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和延胡索乙素的HPLC法的建立

2.1.1 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）3.075 g，精密称定，置150 mL圆底烧瓶中，加70%甲醇50 mL，精密称定，加热回流提取60 min，放冷至室温，再次称量并用70%甲醇补足减失的量，摇匀，经0.45 μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.1.2 对照品溶液的制备

盐酸小檗碱对照品1.305 mg、盐酸巴马汀对照品1.362 mg、延胡索乙素对照品1.268 mg，精密称定，分别置25 mL棕色量瓶中，加甲醇溶解后定容，即得（10 ℃以下保存），制成质量浓度分别为0.052 2 mg/mL、0.054 6 mg/mL、0.050 7 mg/mL的对照品溶液。

2.1.3 色谱条件

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸水溶液（每100 mL加十二烷基磺酸钠0.1 g）为流动相B，按如下规定进行梯度洗脱。0~24 min，45% A；24~35 min，45% A至55% A。流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃，紫外检测波长为280 nm和345 nm，在此条件下对3个成分进行定量（延胡索乙素的检测波长为280 nm，盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的检测波长为345 nm）^［9，10］。非法染色延胡索中延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀的HPLC色谱图见图1。

2.1.4 方法学考察

（1）精密度试验：分别取已配制的盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素对照品溶液，连续进样6次，每次10 μL，测定各成分峰面积，计算得峰面积的RSD分别为1.76%，1.66%，1.36%（见表1），结果表明，仪器精密度都符合要求。

（2）稳定性试验：取未染色的延胡索样品，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液适量，于0，3，6，9，12，24 h进样，测定各成分峰面积，计算得RSD小于3%（见表1），结果表明，样品在24 h内稳定性良好，符合实验要求。

（3）重复性试验：精密称取未染色的延胡索样品各6份，每份0.5 g，按“2.1.1”项制备供试品溶液，按“2.1.3”项方法检测含量，计算得RSD小于3%（见表1），结果表明，该方法重复性良好，符合实验要求。

（4）加样回收率试验：取已知含量的未染色的延胡索样品粉末约0.5 g，精密称定，平行5份，样品含量与对照品分别按1∶1加入各对照品溶液适量，测定并计算各成分的回收率。结果显示，3种指标成分的加样回收率均在96.18%~104.19%（95%~105%可接受范围），平均回收率98.73%~100.99%；回收率RSD均≤2.81%（见表2），提示方法准确性与重复性良好，符合实验要求。

2.1.5 样品测定

盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素各指标含量按照外标一点法进行测定，各样品平行测定3次，取平均值。

2.2 近红外光谱（NIRS）的采集

取延胡索饮片约50 g，精密称定，取适宜浓度的金胺O乙醇液浸泡延胡索一定时间，晾干备用。选择95%乙醇300 mL，金胺O用量选择1，2，5，8，10 g，依次浸泡2，5，10 min。制备不同染色程度延胡索样品，样品信息见表3。将不同程度染色和未染色的延胡索分别于80 ℃烘干，捣碎，过40目筛，混合均匀，置石英样品杯中，装样等量，约5.0 g。采用积分球漫反射模式采集样品光谱图，采集条件：以内置背景为参比，分辨率8 cm^-1，扫描次数64，增益4×，扫描范围4 000~10 000 cm^-1，每个样品重复装样并扫描3次，并求其平均值图谱，每次扫描前摇荡石英杯，使样品均匀平整。10批未染色的延胡索及30批不同程度染色的延胡索，共40批样品的160条NIRS叠加图，结果可见，不同波数区间各曲线吸光度存在明显差异（见图2），说明染色程度不同使延胡索近红外光吸收特性改变，该光谱差异可用于延胡索染色情况鉴别等相关研究。

2.3 定性鉴别模型的建立

2.3.1 模型构建与验证

采用程序自带TQ分析软件中的判别分析法（discriminant analysis）对样品进行定性分析，以准确率为模型评价指标。在TQ软件中导入已采集好的160条NIRS图，按照确定好的校正集和验证集，对选中光谱进行标准化处理，建立相应的数学模型，并进行模型内验证。

2.3.2 结果

最佳建模结果为选取4 500~8 500 cm^-1波段的图谱，对原始光谱进行MSC标准化处理，模型内部验证准确率为100%；染色延胡索与未染色延胡索的数据点呈现出显著的区域分离态势（见图3）。这一结果表明，借助相关分析方法，可对染色与未染色的延胡索实现有效区分，充分体现出该分析手段在延胡索染色鉴别方面具备良好的区分效能。

2.4 延胡索中延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀含量定量模型的建立

2.4.1 定量模型构建与验证

在TQ里分别导入已采集好的40批共160条光谱，分配校正集和验证集，建立数学模型并进行模型内验证。以相关系数（R²）和交叉验证误差均方根（RMSECV）为指标，比较不同模型的性能。R²越接近1，RMSECV和预测均方根误差（RMSEP）接近时，模型越稳定，预测能力强^{［11，12］}。

2.4.2 结果

延胡索乙素含量定量模型最佳建模结果选取4 000~6 000 cm^-1和7 000~8 000 cm^-1波段的图谱，对原始光谱进行MSC标准化处理，模型R²、RMSECV、RMSEP依次为0.984 4，0.341 2，0.355 6；盐酸小檗碱含量定量模型最佳建模结果选取4 000~5 500 cm^-1和7 000~8 000 cm^-1波段的图谱，对原始光谱进行SNV标准化处理，模型R²、RMSECV、RMSEP依次为0.973 5，0.513 7，0.548 5；盐酸巴马汀含量定量模型最佳建模结果选取5 000~6 000 cm^-1和7 000~8 000 cm^-1波段的图谱，对原始光谱进行MSC标准化处理，模型R²、RMSECV、RMSEP依次为0.961 1，0.321 1，0.336 5。

2.5 模型外验证

2.5.1 定性模型外验证

利用所建定性模型对模型外10批未染色延胡索和10批不同程度染色延胡索样品进行预测，结果显示，未染色和染色延胡索样品全部能准确判别，正确率为100%。

2.5.2 定量模型外验证

利用所建定量模型对模型外10批未染色延胡索和10批不同程度染色延胡索样品延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀含量进行预测。NIRS预测值与真实值较为接近，变化趋势一致。对模型预测值与真实值进行配对t检验，检验结果差异无统计学意义（P>0.05，见表4）。

2.6 不同程度染色延胡索改善小鼠醋酸扭体反应实验

2.6.1 分组与给药

取昆明种小鼠，分为模型组、未染色延胡索组、不同程度染色延胡索1%-2组（延胡索经浓度为1%金胺O的95%乙醇溶液染色2 min）、1%-5组、1%-10组、2%-2组、2%-5组、2%-10组、3%-2组、3%-5组、3%-10组，每组10只，各给药组小鼠灌胃相应药物，模型组小鼠灌胃等体积蒸馏水，1次/d，连续7 d，给药浓度均为4 g/kg，给药体积为0.1 mL/10 g。

2.6.2 小鼠醋酸扭体镇痛模型构建与镇痛效果检测结果

末次给药30 min后，各组实验小鼠腹腔注射0.7%冰醋酸溶液（给药剂量为10 mL/kg），以冰醋酸刺激引发小鼠扭体反应（表现为腹部内凹、躯干扭曲、后肢伸展等特征性动作）；随后立即计时，连续观察并记录每只小鼠在20 min内出现的扭体次数，通过以下公式计算各组小鼠的扭体反应抑制率，以量化评价药物对小鼠疼痛反应的抑制效果（即镇痛效果）：

扭体反应抑制率=（模型组小鼠平均扭体次数-给药组小鼠平均扭体次数）/模型组小鼠平均扭体次数×100%。

结果显示，与模型组相比，所有给药组小鼠扭体次数显著减少、扭体反应抑制率显著升高（P<0.05）；但染色延胡索组镇痛效果显著弱于未染色延胡索组（见表5）。进一步分析显示，金胺O浓度超2%或浸染时间达5 min时，延胡索镇痛效果降低更明显（见表5）。

2.7 不同程度染色延胡索改善小鼠热板法疼痛实验

2.7.1 动物筛选

采用热板仪进行小鼠足底致疼，根据小鼠耐受力情况，调节热板仪的温度，调节温度为52~57 ℃。取昆明种小鼠依次放在热板仪进行检测，小鼠因痛开始舔足的时间做为痛阈值，小鼠连续测定3 d，每天1次，取平均值，将平均痛阈值8~25 s以外的小鼠剔除。

2.7.2 分组与给药

将符合条件的小鼠随机分为11组，每组10只，按照2.6.1项分组进行干预给药。各给药组小鼠灌胃相应药物，对照组小鼠灌胃等体积蒸馏水，1次/d，连续7 d。

2.7.3 小鼠热板镇痛模型构建与痛阈检测结果

为排除进食对痛觉反应的干扰，在最后1次给药前12 h对各组小鼠进行禁食处理，期间保持自由饮水；末次给药1.0 h确保药物充分吸收并发挥作用，采用热板仪（通常设定恒定温度，如55 ℃±0.5 ℃）测定各组小鼠的痛阈值，以小鼠出现舔后足、跳跃等逃避反应的时间作为痛阈值判定标准，记录每只小鼠的痛阈值并计算组内平均值。通过以下公式计算痛阈抑制率，量化评价药物对小鼠热痛刺激的镇痛效果，痛阈抑制率越高，表明药物镇痛作用越强：痛阈抑制率=（给药组小鼠平均痛阈值-对照组小鼠平均痛阈值）/对照组小鼠平均痛阈值×100%。

结果显示，与模型组相比，各给药组小鼠痛阈值时间显著增加、痛阈值抑制率显著增高（P<0.05）；但染色延胡索组镇痛效果显著弱于未染色延胡索组，且当金胺O浓度超2%或浸染时间达5 min时，镇痛效果降低更明显（见表6）。

2.8 不同程度染色延胡索改善缩宫素诱导大鼠痛经模型实验

2.8.1 分组

选取健康雌性大鼠，按体质量随机分为11组（每组10只），分组方案参照2.6.1项执行。

2.8.2 动物模型与给药流程

（1）模型预处理（第1~10天）：所有大鼠连续10 d皮下注射苯甲酸雌二醇注射液（0.25 mg/100 g），以促进子宫发育并增强其对缩宫素的敏感性。

（2）给药干预（第4~10天）：自模型预处理第4天起开始给药，连续7 d；各给药组灌胃相应浓度的不同染色程度延胡索提取物（剂量2 g/kg，体积1 mL/100 g）；对照组灌胃等体积蒸馏水；每日干预1次，第10天完成末次给药。

（3）痛经模型诱导（第10天）：末次给药40 min后，所有大鼠腹腔注射0.2 U缩宫素，通过诱导子宫痉挛性收缩模拟痛经发作，随后进行后续检测。

2.8.3 检测指标

行为学指标：注射缩宫素后，立即计时并连续观察30 min，记录每只大鼠的扭体次数（判定标准：腹部内凹、躯干扭曲、后肢伸展及臀部侧旋等特征性反应），按公式计算扭体反应抑制率，量化评价镇痛效果。

氧化应激因子：注射缩宫素1 h后，采用异氟烷麻醉大鼠，眼球取全血，4 ℃、3 000 r/min离心15 min分离血清。采用试剂盒法检测血清中氧化应激相关指标：一氧化氮（NO）含量采用硝酸还原酶法检测；丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸比色法检测；超氧化物歧化酶（SOD）活性采用WST-8法检测；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性采用二硫代二硝基苯甲酸比色法检测。所有检测操作严格遵循试剂盒说明书进行。

2.8.4 检测结果

与模型组相比，各给药组大鼠扭体次数显著减少、抑制率显著升高（均P<0.05），且NO、SOD、GSH-PX等氧化因子水平显著升高、MDA显著降低（P<0.05，见表7）。但染色延胡索组镇痛效果显著弱于未染色组，尤其当金胺O浓度超2%或浸染时间达5 min时，镇痛效果降低更明显（见表7）。

3 讨论

3.1 染色延胡索近红外快检模型的价值与局限

近红外光谱技术因无损、高效特性，已成为中药饮片定性定量分析的重要工具，在黄芪、当归等药材掺假鉴别中，模型准确率常超90%，但现有研究多针对单一成分或单一掺假类型，对多染料同步检测覆盖不足^［13］。同时，黄（橙）色合成染料（金橙Ⅱ、柠檬黄等）是中药非法染色的主要选择，此类染料不仅掩盖药材劣化问题，还可能经代谢蓄积引发慢性毒性^［14］。本研究通过自制多浓度、多浸染时间的金胺O染色延胡索样本构建的近红外模型准确率高，可快速鉴别染色情况并指示指标成分含量，适用于大批量样本初筛，能降低HPLC复检成本。但模型存在局限：样本量不足导致定量精准度待提升；检测范围仅覆盖金胺O，未包含金橙Ⅱ、胭脂红等常见非法染料。综上，本研究结果表明近红外技术适用于中药快速检测，这与文献报道中该技术在同类研究中展现的优势相吻合。但结合文献中多染料染色的风险，单一染料检测模型难以满足实际监管需求，后续需拓展样本范围，开发多染料同步鉴别模型，为药品监管提供更全面的技术支撑。

3.2 染色对延胡索镇痛活性的影响机制

延胡索的镇痛活性主要依赖生物碱类成分（如延胡索乙素），文献明确其含量与镇痛效果呈正相关；同时，合成染料（如金胺O）可能与有效成分发生相互作用，或通过吸附堵塞药材孔隙影响提取，削弱药理活性，且金胺O的潜在神经毒性可能干扰中枢镇痛通路^［15］。本研究发现，金胺O染色显著降低延胡索镇痛活性：对小鼠浸染时间达5 min或浓度超2%时效果显著下降；对大鼠浸染时间达10 min或浓度超2%时效果显著减弱。究其原因，金胺O可能通过三方面影响：与生物碱反应致成分失活、吸附堵塞孔隙降低提取效率、改变细胞壁结构阻碍成分释放，且染料毒性可能叠加风险。本研究结果与文献中“染料影响有效成分含量及活性”的结论一致，并进一步明确了染色时间和浓度的关键阈值。结合文献中染料的毒性报道^［16］，提示染色延胡索存在“药效不足”与“毒性叠加”双重风险，提示临床需严格杜绝其使用，同时为药材验收设定了明确的质量标准。

3.3 非法染色中药的质量危害与临床防控

文献指出，中药饮片非法染色的核心目的是“以次充好”，掩盖药材劣化或伪品属性；中医处方强调“君臣佐使”配伍，单味药质量直接影响整体疗效，劣质药材可能导致“方证不符”，甚至引发毒副反应^［17］。此外，现有研究多聚焦单一药材染色检测，对劣质药材在配伍环境下的疗效影响研究较少^［18］。本研究以染色延胡索为切入点，证实非法染色不仅降低单味药镇痛活性，还可能引入染料毒性，影响处方疗效；建立的近红外快检模型可将质量问题控制在临床用药前，节省临床资源。但当前研究未涉及染色延胡索在复方中的作用，后续需探索其在配伍环境下的疗效影响。

本研究结果与文献中“单味药质量决定处方疗效”的观点相呼应，进一步凸显非法染色药材的临床危害。结合文献中复方研究的不足，后续“配伍环境下疗效影响研究”具有重要价值，可帮助医师精准调整处方，避免误判“方剂无效”；同时，前期快检模型与后续配伍研究可形成“防控-指导”闭环，全方位保障临床用药质量。

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基金资助

山西省中医药管理局科研项目(2024ZYYZ007)

山西省大健康产业高质量发展科研专项课题(DJKZXKT2023060)