抗IL-17A单克隆抗体药物的质量控制

摘要

目的 研究并建立针对抗白细胞介素（IL）-17A单抗关键质量属性的质控方法。方法 采用生长相关基因α（GRO α）细胞因子生物学活性测定法检测生物学活性；采用反相色谱测定肽图谱，采用毛细管等电聚焦电泳（cIEF）测定等电点，采用还原/非还原十二烷基硫酸钠毛细管凝胶电泳（CE-SDS）、分子排阻色谱（SEC-HPLC）进行单抗纯度的测定；运用离子交换色谱（IEC-HPLC）测定电荷异质性；运用亲水-超高效液相色谱（HILIC-UPLC）分析抗IL-17A单抗的糖基化；采用ELISA法检测IL-17A结合活性。结果 抗IL-17A单抗的生物学活性的半数最大效应浓度(EC₅₀)值为（6.70±1.19）ng/mL;IL-17A结合活性的EC₅₀值为（35.60±3.70）ng/mL;cIEF检测的主峰等电点为7.30±0.004；非还原CE-SDS主峰面积百分比为（96.95±0.12）%，还原CE-SDS重链（HC）和轻链（LC）的峰面积百分比之和为（98.38±0.11）%;SEC-HPLC主峰面积百分比为（99.55±0.01）%；离子交换色谱中主峰面积百分比为（73.07±0.12）%，酸性峰面积百分比为（16.52±0.05）%，碱性峰面积百分比为（10.41±0.10）%;N-聚糖分析中高甘露糖基化5单糖所占比例为（1.96±0.03）%，岩藻糖基化所占比例为（88.69±0.44）%，半乳糖基化单糖所占比例为（11.96±0.03）%。结论 本研究成功建立了抗IL-17A单抗关键质量属性的质量控制分析方法，可用于该类单抗产品的质量控制。

关键词

抗白介素17A单抗 / 白介素17A / 纯度 / 生物学活性 / 电荷异质性 / 质量控制