H22原位肝癌及促癌基因诱导肝癌模型小鼠脾脏中Yes1相关蛋白的表达及意义

摘要

目的 探讨H22原位移植及促癌基因诱导肝癌模型小鼠脾脏中，Hippo通路关键效应因子Yes1相关蛋白（Yap1）的表达量与脾脏表型变化之间的关联。方法 通过肝脏原位注射H22肿瘤细胞法和尾静脉注射促癌基因分别构建原位肝瘤小鼠模型和肝癌小鼠模型，相应对照组小鼠则分别接受肝脏原位注射生理盐水和尾静脉注射空载质粒悬液。观察并评估小鼠肝脏和脾脏表型；利用荧光实时定量PCR法（qRT-PCR）和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平检测Yap1在脾脏中的表达情况。使用GEPIA数据库分析肝癌患者正常组织和肿瘤组织中YAP1基因表达，根据YAP1 mRNA表达水平中位数，将肝癌患者分为YAP1高、低表达组，使用Kaplan-Meier生存曲线分析YAP1在肝癌预后和诊断中的价值。结果 与各自对照相比，H22肿瘤细胞肝脏原位瘤模型小鼠的脾脏质量明显增加（P<0.001），尾静脉注射促癌基因模型小鼠的脾脏质量也增加（P<0.05）。与对照小鼠相比，肝脏原位注射H22肿瘤细胞小鼠脾脏中Yap1和Taz的mRNA表达降低（P<0.01），但脾脏中Yap1的蛋白表达差异无统计学意义。与对照小鼠相比，尾静脉注射促癌基因小鼠脾脏中Yap1的mRNA和蛋白表达均无明显变化（P>0.05）;Taz的mRNA表达升高（P<0.001）。同时肝癌患者肿瘤组织与正常组织中，YAP1基因表达差异无统计学意义（P>0.05），并与肝癌患者总生存期和无病生存期无关。结论 H22原位肝癌及促癌基因诱导肝癌模型小鼠伴随脾脏质量增加，但脾脏中Yap1蛋白表达无显著变化，表明肝癌诱导的脾脏表型变化可能是非依赖Yap1蛋白的细胞增殖过程。

关键词

肝癌 / 脾脏 / 肝脏 / Yap1 / Hippo信号通路 / 促癌基因 / 尾静脉注射 / 小鼠