瑞香素增强肺癌细胞放疗敏感性的机制研究

摘要

目的 探讨瑞香素对Lewis肺癌（Lewis lung cancer,LLC）细胞小鼠移植瘤的放射增敏机制。方法 建立肺癌LLC细胞小鼠移植瘤模型；待移植瘤平均体积增至约80 mm³，且大小均一（为第0天），将24只小鼠随机分为4组：对照组、瑞香素组、照射组以及瑞香素+照射组。分别于第2～6天对瑞香素组和瑞香素+照射组小鼠腹腔注射20 mg/kg的瑞香素，每天1次，共5次；对照组与照射组则注射等量生理盐水。于第6,8,10天，照射组和瑞香素+照射组同步接受3次局部4 Gy的放射线照射。第11天起各组均不再予特殊处理。自第0日起，每隔1天测量1次小鼠肿瘤体积，待对照组小鼠肿瘤体积最大增长至接近1 500 mm³时（第26天），颈椎脱臼法处死小鼠，测量移植瘤体积，计算肿瘤体积抑制率（抑瘤率）；Western blot法检测瘤体细胞内p53、核糖核苷酸还原酶调节亚基M2（RRM2）及细胞周期蛋白（Cyclin D1）蛋白表达水平；免疫荧光法检测Cyclin D1荧光强度。结果 与对照组相比，瑞香素组、照射组及瑞香素+照射组小鼠移植瘤体积均减小（P<0.01）。与瑞香素组或照射组相比，瑞香素+照射组瘤体体积减小（P<0.01），抑瘤率明显提高（P<0.01）。在蛋白表达方面，与对照组相比，瑞香素组与瑞香素+照射组p53表达明显升高（P<0.001）,RRM2和Cyclin D1表达降低（P<0.05），而照射组RRM2和Cyclin D1表达升高（P<0.05）。与照射组相比，瑞香素+照射组p53表达明显升高（P<0.001）,RRM2与Cyclin D1表达明显降低（P<0.001）。免疫荧光方面，与对照组相比，瑞香素组与瑞香素+照射组Cyclin D1荧光强度降低（P<0.01），照射组则明显升高（P<0.001）。与照射组相比，瑞香素+照射组Cyclin D1荧光强度明显降低（P<0.001）。结论 增敏剂量的瑞香素可增强放疗对肺癌LLC细胞小鼠移植瘤的生长抑制效果，起到放疗增敏作用，可能与其激活p53进而抑制RRM2及Cyclin D1的形成，阻碍肿瘤细胞修复有关。

关键词

肺癌 / LLC / 放疗增敏 / 瑞香素 / p53 / RRM2 / Cyclin D1