抗EGFR/c-Met双特异性抗体药物的质量控制

摘要

目的 研究并建立抗表皮生长因子受体（EGFR）和细胞间质上皮转换因子（c-Met）的双特异性抗体药物关键质量属性（CQA）的质控方法。方法 采用反相超高效液相色谱技术对抗EGFR/c-Met双抗进行肽图鉴别；采用分子排阻色谱（SEC）、非还原/还原十二烷基硫酸钠毛细管电泳（nr/r CE-SDS）和成像毛细管等电聚焦电泳（icIEF）分析抗EGFR/c-Met双抗药物的纯度；采用疏水液相色谱（HIC）分析抗EGFR/c-Met双抗药物的同源二聚体杂质含量；采用多属性监测方法（MAM）分析抗EGFR/c-Met双抗异构化和氧化修饰的含量；采用时间分辨荧光共振能量转移法分析抗EGFR/c-Met双抗药物与c-Met抗原的结合活性；采用荧光素酶报告基因法分析抗EGFR/c-Met双抗药物的生物学活性。结果 对于抗EGFR/c-Met双抗药物，肽图分析检测到全部特征肽段，起到良好的鉴别作用。经SEC和CE-SDS检测，其纯度分别为（99.24±0.00）%和（98.44±0.10）%；经icIEF检测，其主峰、酸性峰和碱性峰的面积百分比分别为（74.44±0.55）%、（22.91±0.28）%和（2.64±0.31）%；经HIC检测，其同源二聚体杂质含量均小于定量限；经MAM检测，其异构化和氧化修饰的含量分别为（0.62±0.01）%和（2.35±0.03）%；相对于参比品，抗EGFR/c-Met双抗药物的结合活性和生物学活性分别为（99.00±10.78）%和（103.50±10.09）%。结论 针对抗EGFR/c-Met双抗的理化和生物学特性，研究并建立了其关键质量属性的质控方法，从质量可控角度确保该类产品的临床安全性和有效性。

关键词

表皮生长因子受体 / 细胞间质上皮转换因子 / 双特异性抗体 / 关键质量属性 / 纯度分析 / 生物学活性