敲低RASSF9通过抑制PI3K/AKT通路提高耐药肺腺癌细胞对阿美替尼的敏感性

摘要

目的 探讨Ras关联域的蛋白质9（RASSF9）对肺腺癌细胞阿美替尼耐药的影响，并阐明其分子机制。方法 构建RASSF9干扰慢病毒及其相应阴性对照（NC）载体，分别转染至非小细胞肺癌细胞系HCC827、人肺腺癌细胞系NCI-H1975的阿美替尼耐药细胞株（HCC827/AR、H1975/AR），即将细胞分别分为正常对照组（control）、NC组和shRASSF9组。采用浓度梯度递增法检测RASSF9敲低后阿美替尼耐药细胞株半抑制浓度(IC₅₀)的变化；采用CCK-8法、流式细胞术检测RASSF9敲低后耐药细胞增殖及凋亡；采用Western blot检测RASSF9和PI3K/Akt通路相关蛋白的表达。结果 与control组及NC组相比，shRASSF9组HCC827/AR和H1975/AR对阿美替尼IC₅₀显著降低（P<0.01）。与control组及NC组比较，shRASSF9组HCC827/AR、H1975/AR细胞活力显著降低、细胞凋亡率显著增加（均P<0.01）。Western blot结果显示，与control组和NC组比较，shRASSF9组HCC827/AR、H1975/AR细胞中RASSF9的表达水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比值显著降低（P<0.01）。结论 RASSF9敲低可降低肺腺癌耐药细胞对阿美替尼的耐药性，其作用机制与抑制PI3K/Akt信号通路相关。

关键词

阿美替尼 / 耐药 / 肺腺癌 / RASSF9 / PI3K/Akt通路