RGS19基因敲低对胶质母细胞瘤增殖的影响及其机制

摘要

目的 探究G蛋白信号调节因子（RGS19）对胶质母细胞瘤增殖和凋亡的作用及其分子机制。方法 利用GEPIA数据库分析RGS19在胶质母细胞瘤组织中的表达及其与患者预后的关联。构建RGS19基因敲低和过表达的U251细胞株，采用克隆形成实验和EdU实验评估细胞增殖能力，TUNEL染色评估细胞凋亡水平，Western blot分析相关蛋白表达水平，双荧光自噬流技术检测细胞自噬状态。进一步通过自噬激动剂雷帕霉素激活自噬，检测自噬在RGS19调控细胞增殖和凋亡中的介导作用。此外，构建裸鼠皮下移植瘤模型，研究敲低RGS19基因对体内肿瘤的抑制效果。结果 RGS19在胶质母细胞瘤组织及细胞系中显著高表达（P<0.05），且与患者不良预后呈正相关（P<0.05）。敲低RGS19基因可显著抑制U251细胞增殖活性和克隆形成能力（P<0.01），同时诱导细胞凋亡（P<0.01）。此外，敲低RGS19基因还可抑制自噬活性（P<0.01），表现为LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平降低和p62蛋白水平升高（P<0.01）。雷帕霉素可部分逆转RGS19基因敲低导致的细胞增殖抑制和凋亡增加的现象（P<0.05）。相反，过表达RGS19基因显著抑制细胞凋亡，并增强了LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的蛋白表达（均P<0.05）。裸鼠皮下移植瘤模型进一步证实，RGS19基因敲低组肿瘤体积较阴性对照组显著减小（P<0.01）。结论 敲低RGS19基因可能通过抑制细胞自噬活性抑制肿瘤生长，提示RGS19是胶质母细胞瘤潜在的治疗新靶点。

关键词

胶质母细胞瘤 / RGS19 / 自噬 / 增殖 / 凋亡