基于多组分分析的鲜石斛糜质量提升及其对胰岛素抵抗的改善作用

摘要

目的 提升并完善鲜石斛糜的质量控制方法并探究其对HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）的作用。方法 采用多组分分析模式分别建立鲜石斛糜总多糖、甘露糖的含量测定方法，据此优化鲜石斛糜质量标准。采用高糖、高胰岛素联合诱导HepG2细胞，构建IR-HepG2细胞模型。采用CCK-8法检测各浓度多糖对HepG2细胞的毒性作用，葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖消耗量，评价多糖对IR-HepG2细胞胰岛素抵抗的改善效果。结果 所建立的含量测定方法中总多糖在0.02～0.12 mg/mL范围内线性关系良好（R²=0.999 1），甘露糖在40～200μg/mL范围内线性关系良好（R²=0.999 0）。鲜石斛糜中总多糖、甘露糖的平均含量分别为62.02 mg/g和36.45 mg/g。CCK-8实验结果显示，0.2～0.8 mg/mL范围内鲜石斛糜多糖对HepG2细胞存活率无显著影响（P>0.05），无明显毒性；葡萄糖消耗量检测结果显示，各给药组IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量均显著提高（P<0.05），其中0.6 mg/mL浓度组葡萄糖消耗量最高。结论 本研究建立的总多糖、甘露糖含量测定方法经方法学验证合格，可提升鲜石斛糜的质量控制；0.2～0.8 mg/mL鲜石斛糜总多糖含量对HepG2细胞无明显毒性，且能有效改善其胰岛素抵抗状态，其中0.6 mg/mL为该实验条件下的最优作用浓度，可为鲜石斛糜质量标准完善及降血糖药理研究打下坚实基础。

关键词

鲜药 / 鲜石斛糜 / 多糖 / 质量控制 / 胰岛素抵抗 / HepG2