亚硫酸钠对与脂肪细胞共培养的肝细胞脂肪代谢的影响

摘要

目的 探讨亚硫酸钠（Na₂SO₃）是否通过干扰脂肪细胞脂联素分泌进而影响肝细胞的脂肪代谢。方法 将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞。用完全培养基（阴性对照）、不同浓度Na₂SO₃（0.02,0.1,0.5,2.5 mmol/L）和1 mmol/L油酸（OA，阳性对照）处理脂肪细胞、单独培养HepG2细胞和共培养HepG2细胞。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定脂肪细胞培养上清中游离脂肪酸（FFA）和脂联素含量；采用甘油-3-磷酸氧化酶-过氧化物酶偶联法（GPO-POD）测定甘油三酯（TG）含量；采用免疫印迹法（Western blot）检测TG代谢相关蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、脂肪酸合成酶（FASN）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPKα）、肉碱酯酰转移酶1（CPT-1）的相对表达水平。结果 与阴性对照相比，Na₂SO₃各处理组脂肪细胞培养上清中FFA含量明显减少（P<0.001），脂联素的含量明显减少（P<0.01）。2.5 mmol/L Na₂SO₃可引起共培养HepG2细胞内TG含量增加（P<0.001）。Western blot结果显示，在单独培养组，与阴性对照相比，各浓度Na₂SO₃处理后，SREBP-1c、p-ACC、AMPKα、CPT-1无明显变化（P>0.05）;2.5 mmol/L Na₂SO₃处理后，ACC和FASN蛋白表达增高（P<0.05）。在共培养组中，与阴性对照相比，各浓度Na₂SO₃处理组ACC和AMPKα的蛋白表达均增高（P<0.05）。结论 较低剂量Na₂SO₃暴露不会引起肝细胞内TG的增加。较高剂量的Na₂SO₃（2.5 mmol/L）可能通过对脂肪细胞脂联素分泌的抑制作用引起肝细胞中TG明显升高。

关键词

亚硫酸钠 / 脂肪细胞 / HepG2细胞 / 细胞共培养 / 脂肪酸 / 脂联素 / 甘油三酯