香叶木素通过增强PIK3R1 mRNA稳定性抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移

摘要

为探究香叶木素对乳腺癌细胞侵袭和迁移的抑制作用及其分子机制,首先以不同剂量(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L)的香叶木素处理MCF7和MDA-MB-231细胞24 h,通过细胞侵袭实验和细胞划痕愈合实验分别检测乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,并通过蛋白质印迹法(Western-blot)分析香叶木素对转移相关蛋白质表达的影响;其次,基于GEO(Gene Expression Omnibus)数据库分析乳腺癌组织中的差异表达基因,并通过本草组鉴数据库获得香叶木素的调控靶点;再次,通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR, qRT-PCR)和Western-blot分析香叶木素对磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基1(phosphatidylinositol 3-kinase, regulatory subunit1, PIK3R1)表达的影响;最后,利用放线菌素D考察香叶木素对PIK3R1 m RNA稳定性的影响。结果显示,香叶木素能显著抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,且呈剂量依赖性(P<0.05);同时,香叶木素以剂量依赖的形式显著上调上皮钙黏素(E-cadherin)水平,并显著下调神经钙黏素(N-cadherin)和基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2, MMP2)水平。此外, PIK3R1既是乳腺癌组织中的差异表达基因也是香叶木素的调控靶点, PIK3R1低水平乳腺癌患者的无病生存效果更差(P<0.05);而香叶木素处理可显著上调PIK3R1 m RNA和蛋白质水平(P<0.05),同时能显著提高PIK3R1 m RNA的稳定性。上述结果表明,香叶木素能抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,该过程可能通过提高PIK3R1 m RNA的稳定性实现。

关键词

香叶木素 / 磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基1 (PIK3R1) / 乳腺癌 / 侵袭 / 迁移