肝素结合蛋白快速检测方法的建立

摘要

脓毒症是一种由感染引起的全身性炎症反应综合征,患者常并发器官功能障碍,这是导致重症感染患者死亡的关键因素。肝素结合蛋白(heparin-binding protein, HBP)是一种源自中性粒细胞的多功能介质,其水平与脓毒症的严重程度密切相关,在脓毒症早期诊断和预后评估方面具有作为生物标志物的巨大潜力。本研究经载体构建、原核表达,将纯化的重组HBP作为免疫原免疫小鼠;随后,通过细胞融合等技术筛选了4株稳定分泌抗HBP抗体的细胞株,并通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)分析了抗体性质;最后,选择m Ab 11为标记抗体, m Ab 18为捕获抗体,建立了针对HBP的胶体金免疫层析法。本研究利用重组HBP成功制备了抗HBP的单克隆抗体,并初步建立了HBP的快速检测方法,该方法在资源有限地区或需要快速判断感染严重程度的场景中具有重要意义。

关键词

感染 / 脓毒症 / 肝素结合蛋白(HBP) / 原核表达 / 单克隆抗体(mAb) / 胶体金免疫层析法