姜黄素通过调控SIRT3/SOD2信号通路对阿霉素引起心肌细胞毒性的减轻作用

摘要

目的：探讨姜黄素改善阿霉素（DOX）诱导的心肌H9c2细胞毒性的作用，并阐明其作用机制。方法：采用DOX处理H9c2细胞建立心肌细胞毒性模型。将H9c2细胞分为正常组、DOX组、DOX+姜黄素组和DOX+姜黄素+沉默信息调节蛋白3 (SIRT3)抑制剂3-TYP+DOX组（DOX+姜黄素+3-TYP组）。24 h后观察各组细胞形态表现，CCK-8法检测各组细胞活性，TUNEL染色检测各组细胞凋亡率，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞中过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）水平，2,7-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）染色检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶2 (NOX2)、NADPH氧化酶4 (NOX4)、SIRT3、乙酰化超氧化物歧化酶2 (Ac-SOD2)和超氧化物歧化酶2 (SOD2)蛋白表达水平。结果：与对照组比较，DOX组H9c2细胞肿胀，细胞活性降低（P<0.05），细胞中CAT和SOD活性降低（P<0.05）,MDA和ROS水平升高（P<0.05）,NOX2和NOX4蛋白表达水平升高（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值和SIRT3蛋白表达水平降低（P<0.05）,SOD和Ac-SOD2蛋白表达水平升高（P<0.05）；与DOX组比较，DOX+姜黄素组H9c2细胞形态改善，细胞活性升高（P<0.05），细胞中CAT和SOD活性升高（P<0.05）,MDA和ROS水平降低（P<0.05）,NOX2和NOX4蛋白表达水平降低（P<0.05）, Bcl-2/Bax比值和SIRT3蛋白表达水平升高（P<0.05）,SOD2和AcSOD2蛋白表达水平降低（P<0.05）；与DOX+姜黄素组比较，DOX+姜黄素+3-TYP组细胞肿胀，细胞密度和细胞活性明显降低（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞中CAT和SOD活性降低（P<0.05）,MDA水平和ROS水平明显升高（P<0.05）,NOX2和NOX 4蛋白表达水平升高（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值和SIRT3蛋白表达水平降低（P<0.05）,SOD2和Ac-SOD2蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：姜黄素通过激活SIRT3/SOD2信号抑制氧化应激和细胞凋亡，改善细胞活性，减轻DOX引起的心肌H9c2细胞毒性。

关键词

姜黄素 / 阿霉素 / 沉默信息调节蛋白 / 氧化应激 / 心肌毒性