樱黄素通过调控JNK/p38通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

摘要

目的:探讨樱黄素对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠神经元的保护作用,并阐明其可能的机制。方法:36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量樱黄素组(3.5 mg·kg^-1)、中剂量樱黄素组(7.0 mg·kg^-1)、高剂量樱黄素组(14.0 mg·kg^-1)和阳性药依达拉奉（Eda）组,每组6只。采用Zealonga法评价各组大鼠神经功能损伤程度,旷场实验检测各组大鼠自主运动功能,氯化三苯基四氮唑（TTC）染色检测各组大鼠脑梗死面积,HE染色和尼氏染色观察各组大鼠脑组织病理形态表现。另取21只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、樱黄素组、c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂组、p38抑制剂组、JNK抑制剂+樱黄素组和p38抑制剂+樱黄素组,每组3只。采用TUNEL染色检测各组大鼠神经元的凋亡情况,Western blotting法检测各组大鼠脑梗死侧脑组织中凋亡相关蛋白和JNK/p38通路相关蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高（P<0.001）,大鼠总运动距离缩短（P<0.001）,脑梗死面积占比升高（P<0.001）。假手术组大鼠脑组织神经元结构清晰,排列有序,尼氏小体数量丰富,未发现明显的病理变化。与模型组比较,中和高剂量樱黄素组大鼠神经功能缺损评分降低（P<0.05）,总运动距离增加（P<0.05）,脑梗死面积占比降低（P<0.05）,神经元出现排列紊乱、细胞质浓缩、细胞核固缩和尼氏小体溶解脱失的现象减轻。与假手术组比较,模型组大鼠神经元凋亡阳性率明显升高（P<0.001）,大鼠脑组织中B细胞淋巴瘤2 （Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和cleaved Caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,樱黄素组大鼠神经元凋亡阳性率明显降低（P<0.05）,大鼠脑组织中Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.001）。与抑制剂组比较,抑制剂+樱黄素组大鼠神经元凋亡阳性率降低（P<0.01）,大鼠脑组织中p-JNK和p-p38蛋白表达水平均降低（P<0.05）,p-JNK/JNK和p-p38/p38比值均降低（P<0.05）。结论:樱黄素具有减轻大鼠神经功能损伤、减小脑梗死面积、减轻病理损伤和抑制神经元凋亡的作用,其作用机制可能与调控JNK/p38信号通路抑制神经元有关。

关键词

樱黄素 / 脑缺血再灌注损伤 / 细胞凋亡 / C-Jun氨基末端激酶 / 神经元