黄芪甲苷对顺铂所致小鼠肝损伤的抑制作用及其机制

摘要

目的:探讨黄芪甲苷（AS-Ⅳ）对顺铂（CDDP）所致小鼠肝损伤的抑制作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只体质量为18～22 g的C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组、AS-Ⅳ组和腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂（Compound C）+AS-Ⅳ组。对照组和模型组小鼠灌胃等量生理盐水,连续给药9d;AS-Ⅳ组和Compound C+AS-Ⅳ组小鼠灌胃AS-Ⅳ水溶液(150 mg·kg^-1·d^-1);实验第6天Compound C+AS-Ⅳ组小鼠腹腔注射Compound C (20 mg·kg^-1);第7天除对照组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余各组小鼠腹腔注射20 mg·kg^-1 CDDP建立小鼠肝损伤模型,48 h后处死小鼠。收集各组小鼠血清和肝组织,采用试剂盒检测各组小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平以及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）水平,HE染色法观察各组小鼠肝组织病理形态学表现,免疫组织化学染色法检测各组小鼠肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶4 （GPX4）、铁蛋白重链1 （FTH1）和铁死亡抑制蛋白1 （FSP1）的蛋白表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肝组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素氧合酶1 （HO-1）和AMPK蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清中AST和ALT水平明显升高（P<0.01）,肝组织中SOD和CAT活性明显降低（P<0.01）,MDA水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,AS-Ⅳ组小鼠血清中AST和ALT水平明显降低（P<0.01）,肝组织中MDA水平降低（P<0.01）,SOD和CAT活性升高（P<0.01）;与AS-Ⅳ组比较,Compound C+AS-Ⅳ组小鼠血清中AST和ALT水平升高（P<0.01）,肝组织中MDA水平升高（P<0.05）,SOD和CAT活性降低（P<0.01）。HE染色,与对照组比较,模型组小鼠肝脏损伤程度增强,肝细胞排列紊乱,部分肝细胞水肿;与模型组比较,AS-Ⅳ组小鼠肝脏形态恢复正常;与AS-Ⅳ组比较,Compound C+AS-Ⅳ组小鼠肝细胞排列紊乱且边缘较为模糊。免疫组织化学法,与对照组比较,模型组小鼠肝组织中GPX4、FTH1和FSP1蛋白表达水平降低（P<0.05）;与模型组比较,AS-Ⅳ组小鼠肝组织中GPX4、FTH1和FSP1蛋白表达水平升高（P<0.05）;与AS-Ⅳ组比较,Compound C+AS-Ⅳ组小鼠肝组织中GPX4、FTH1和FSP1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。Western blotting法,与对照组比较,模型组小鼠肝组织中Nrf2、HO-1和AMPK蛋白表达水平降低（P<0.01）;与模型组比较,AS-Ⅳ组小鼠肝组织中Nrf2、HO-1和AMPK蛋白表达水平升高（P<0.01）;与AS-Ⅳ组比较,Compound C+AS-组小鼠肝组织中Nrf2、HO-1和AMPK蛋白表达水平降低（P<0.01）。结论:AS-Ⅳ可以减轻CDDP引起的小鼠肝损伤,其作用机制可能与AS-Ⅳ调控AMPK/Nrf2/HO-1信号通路及铁死亡有关。

关键词

黄芪甲苷 / 顺铂 / 肝损伤 / 铁死亡 / 腺苷酸活化蛋白激酶