TUG-891对缺血缺氧诱导的缺血性脑卒中的保护作用及其机制

摘要

目的：探讨TUG-891对缺血缺氧诱导的缺血性脑卒中（IS）的保护作用，并阐明其可能的作用机制。方法：将60只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组[远端大脑中动脉闭塞（dMCAO）组]和dMCAO+TUG-891组（dMCAO+TUG-891组），每组20只，造模后连续3 d给予小鼠腹腔注射TUG-891溶液(35 mg·kg^-1·d^-1)。采用改良神经功能缺损评分（mNSS）和转棒实验评估各组小鼠神经功能情况，2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法观察各组小鼠脑梗死体积，生化法检测各组小鼠脑组织上清液中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性，苏木精-伊红（HE）和尼氏（NISSL）染色观察各组小鼠脑组织病理形态表现，末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记法（TUNEL）染色检测各组小鼠脑组织中神经细胞凋亡指数，Western blotting法检测各组小鼠脑组织中G蛋白偶联受体78（GPR78）、 PKR样内质网激酶（PERK）和磷酸化PERK（p-PERK）和CHOP蛋白表达水平。结果：mNSS和转棒实验，与假手术组比较，dMCAO组小鼠mNSS明显升高（P<0.01），在棒时间明显减少（P<0.01）；与dMCAO组比较，dMCAO+TUG-891组小鼠mNSS降低（P<0.05），在棒时间增加（P<0.05）。TTC染色法，与假手术组比较，dMCAO组小鼠脑梗死体积增大（P<0.01）；与dMCAO组比较，dMCAO+TUG-891组小鼠脑梗死体积明显减小（P<0.01）。HE染色，与假手术组比较，dMCAO组小鼠大脑皮层严重受损，表现为梗死区神经细胞排列紊乱及细胞核明显固缩。dMCAO+TUG-891组小鼠脑梗死区神经细胞形态损伤得到明显改善。NISSL染色，dMCAO组小鼠大脑皮层梗死区尼氏小体变细拉长，脱失增多；dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织病理损伤均得到明显改善。与假手术组比较，dMCAO组大鼠脑组织中MDA水平明显升高（P<0.01）,SOD活性降低（P<0.01）；与dMCAO组比较，dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织中MDA水平明显降低（P<0.01）,SOD活性明显升高（P<0.01）。TUNEL染色，与假手术组比较，dMCAO组小鼠脑组织中神经细胞凋亡指数升高（P<0.01）；与dMCAO组比较，dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织中神经细胞凋亡指数降低（P<0.01）。与假手术组比较，dMCAO组小鼠脑组织中GRP78、p-PERK和CHOP蛋白表达水平升高（P<0.05）；与dMCAO组比较，dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织中GRP78、p-PERK和CHOP蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论：TUG-891可以减轻IS引起的神经损伤，其作用机制可能与TUG-891抑制内质网应激和细胞凋亡有关。

关键词

缺血性脑卒中 / G蛋白偶联受体78 / TUG-891 / 内质网应激 / 细胞凋亡