莲草直胸跳甲短神经肽F受体基因sNPFR的克隆及表达分析

摘要

为明确莲草直胸跳甲（Agasicles hygrophila）短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点，为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础，利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析，通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直胸跳甲不同发育时期和组织中的时空表达谱。结果表明，克隆获得基因AhsNPFR全长1 669 bp，开放阅读框1 257 bp，编码418个氨基酸；预测其蛋白质分子质量为48.11 ku，理论等电点为8.21,AhsNPFR具有7个典型保守跨膜结构域，属于GPCRs家族，系统进化树分析表明，其与玉米根萤叶甲Diabrotica virgifera virgifera sNPFR亲缘关系最近。AhsNPFR基因在不同发育阶段均有表达，在1龄幼虫中的表达量最高，是卵中表达量的9.06倍；在卵中表达量最低；雌成虫的表达量显著高于雄成虫。AhsNPFR基因在不同组织中均有表达，在3龄幼虫后肠中显著高表达，是脂肪体表达量的12.21倍；在雌雄成虫后肠显著高表达，并在所有组织中均没有雌雄表达差异。

关键词

莲草直胸跳甲 / 短神经肽F受体基因sNPFR / 基因克隆 / 发育时期表达 / 组织表达