黄芪-莪术-重楼配伍激活PERK/eIF2α/ATF4信号通路介导抑制结直肠癌生长转移作用研究

摘要

目的 探讨黄芪-莪术-重楼（芪-术-蚤）配伍通过激活PERK/eIF2α/ATF4信号通路介导内质网应激（ER stress）抗结直肠癌生长、转移相关作用。方法 BALB/c雄性小鼠30只随机分为假手术组、模型组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组(25 mg·kg^-1)、芪-术-蚤高剂量组(5.85 g·kg^-1)、芪-术-蚤低剂量组(2.925 g·kg^-1),每组6只，构建结直肠癌原位移植瘤小鼠模型，给药15 d后，通过肿瘤体积大小变化评估芪-术-蚤配伍对肿瘤生长的干预效果；通过HE染色评估芪-术-蚤角药配伍干预后小鼠肝脏组织、肿瘤组织变化情况。采用ELISA法检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平变化；Western blot检测PERK/eIF2α/ATF4信号通路和上皮细胞-间充质转化（EMT）相关蛋白表达。结果 与模型组相比，芪-术-蚤高剂量组肿瘤体积明显减小（P<0.000 1）、肝脾转移灶较不明显，肝组织和肿瘤组织病理染色结果产生变化，下调氧化应激相关指标GSH-Px、SOD水平，上调MDA水平，上调ER stress相关蛋白磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶（p-PERK）、磷酸化真核启动因子2α（p-eIF2α）、转录激活因子4（ATF4）等的表达，上调上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、下调神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、锌指转录因子（Snail）的蛋白表达水平，抑制EMT过程。结论 芪-术-蚤角药配伍可能通过激活PERK/eIF2α/ATF4通路诱导持续的ER stress,影响结直肠癌EMT过程，从而抑制结直肠癌的生长转移。

关键词

芪-术-蚤 / 角药 / 内质网应激 / 上皮细胞-间充质转化 / 结直肠癌